RNA干扰沉默EZH2基因增强人肝癌多药耐药Bel/Fu细胞对氟尿嘧啶的敏感性

摘要：

目的 研究沉默人肝癌多药耐药Bel/Fu细胞的EZH2基因表达是否影响癌细胞对氟尿嘧啶( fluorouracil,5-Fu)的敏感性.方法 体外培养肝癌多药耐药Bel/Fu细胞；EZH2 siRNA干扰沉默EZH2基因表达；RT-PCR和Western blot检测干扰后EZH2 mRNA和蛋白的表达水平；MTT法检测细胞生长抑制率；Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡率；流式细胞仪分析细胞周期；Western blot检测多药耐药相关蛋白MDR1的表达水平.实验设对照组、5-Fu处理组、EZH2 siRNA处理组、5-Fu和EZH2 siRNA联合处理组.结果 EZH2 siRNA干扰24h后,EZH2 mRNA和蛋白的表达水平明显降低.在联合处理组中,MTF法检测其细胞凋亡抑制率为43.17％±3.81％,明显高于其他3组；流式检测联合处理组细胞凋亡率,其细胞凋亡值为30.4％±1.77％,明显高于其他3组.流式检测联合处理组细胞周期,发现联合组G1期细胞的百分比为69.16％±2.31％,明显高于其他3组,S+G2 +M期细胞的百分比为30.76％±1.29％,明显低于其他3组,细胞周期被阻滞于G1期.检测MDR1在联合组中的表达水平,发现MDR1蛋白的表达水平明显低于其他组别.结论 RNA干扰沉默EZH2基因可以增强Bel/Fu细胞对5-Fu的敏感性,其机制可能与MDR1蛋白表达降低有关.

关键词：肝肿瘤、基因沉默、RNA干扰、多药耐药相关蛋白类

所属期刊栏目：27

分类号：R6(外科学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划基金资助项目2006AA02A309

在线出版日期：2012-12-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：660-663