木犀草素对黑素瘤B16细胞系生长、转移及血管生成拟态形成的抑制作用研究

摘要：

目的 观察木犀草素对黑素瘤B16细胞系生长、转移及血管生成拟态形成能力的影响.方法 体外培养黑素瘤B16细胞系,按培养基中木犀草素浓度分为低、中、高剂量组(2.5、5、10 μmol/L)以及对照组(0.1％二甲基亚砜处理),分别通过划痕实验、Transwell侵袭实验、管道形成实验观察各组黑素瘤细胞迁移、侵袭及管道形成能力.建立C57小鼠B16黑素瘤皮下移植瘤模型,随机分为对照组(超纯水灌胃)及木犀草素低(10 mg/kg)、中(20 mg/kg)、高(40 mg/kg)剂量组,每组3只,木犀草素组按上述剂量每天给予灌胃,给药至荷瘤第28天处死小鼠,解剖取小鼠肺及肿瘤组织,观察各组移植黑素瘤生长、转移及血管生成拟态情况;通过免疫荧光、免疫组化实验观察木犀草素对移植黑素瘤血管内皮钙黏蛋白(VE-Cad)、血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)、VEGFR2、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9表达的影响.多组间均数比较采用单因素方差分析或秩和检验.结果 体外实验结果显示,对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组B16细胞在48 h时相对划痕宽度分别为0.47±0.04、0.64±0.04、0.73±0.03、0.84±0.04,差异有统计学意义(F=34.51,P＜0.001),木犀草素低、中、高剂量组细胞迁移能力均低于对照组(均P＜ 0.05).4组细胞在培养24 h时穿过小室膜的细胞数量分别为281.00±8.79、169.00±15.35、92.00±14.79、57.00±13.72,差异有统计学意义(F=275.30,P＜ 0.001),木犀草素低、中、高剂量组侵袭能力均低于对照组(P＜0.01);管道形成数量分别为20.00±2.77、11.00±1.28、7.00±1.86、2.00±1.32,差异有统计学意义(F=48.61,P＜0.001),低、中、高剂量组均低于对照组(P＜ 0.01).体内实验结果显示,对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组肿瘤终体积分别为(5.10±1.72)、(4.02±2.13)、(2.98±0.92)、(1.49±1.13) cm3,差异有统计学意义(F=28.76,P＜0.001);低、中、高剂量木犀草素组均小于对照组(t值分别为3.86、7.11、13.06,均P＜0.01).CD31-PAS双染结果显示,对照组血管生成拟态形成数量高于木犀草素给药组(P＜0.01).在体内与体外实验中,木犀草素高剂量组细胞及小鼠肿瘤组织内血管生成拟态相关标志物的表达水平均低于对照组(均P＜ 0.05).结论 木犀草素可以有效抑制黑素瘤生长、转移及血管生成拟态的形成.

关键词：黑色素瘤、实验性、木犀草素、肿瘤转移、受体、血管内皮生长因子、胶原酶类、血管拟态

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在线出版日期：2019-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：401-407