10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2018.06.013
siRNA干扰Gadd45α表达对皮肤鳞状细胞癌A431细胞侵袭和迁移的影响
目的 探讨靶向沉默生长抑制和DNA损伤诱导45蛋白α(Gadd45α)对皮肤鳞状细胞癌(简称鳞癌)细胞株A431侵袭和迁移的影响.方法 采用实时荧光定量PCR、Western印迹检测A431和Colon16细胞Gadd45α基因和蛋白的表达,选取高表达Gadd45α的A431细胞株作为研究对象.将A431细胞分为实验组、阴性对照组和空白对照组:实验组转染Gadd45α-siRNA-1,阴性对照组转染阴性对照siRNA,空白对照组不做任何处理.采用实时荧光定量PCR和Western印迹法分别检测干预后Gadd45α mRNA和蛋白的表达,Transwell小室法及细胞划痕法检测干预对A431细胞株侵袭及迁移能力的影响.结果 A431细胞高表达Gadd45α基因和蛋白.干预后实验组A431细胞Gadd45α mRNA及蛋白相对表达量分别为0.286±0.013、0.33±0.007,明显低于阴性对照组组(1.028±0.183、0.87±0.002)以及空白对照组(1.001±0.057、0.86±0.004),差异均有统计学意义(F值分别为5 893.857、2 763.000,均P<0.001).实验组A431细胞株穿过聚碳酸酯膜的细胞数为66.33±3.79,明显多于阴性对照组(26.00±4.36)和空白对照组(28.33±4.16),3组间差异有统计学意义(F=20.084,P=0.002).划痕实验中,实验组每高倍视野下细胞迁移数为315.33±6.66,明显多于阴性对照组(154.67±2.08)和空白对照组(130.67±3.51),3组间差异有统计学意义(F=1 676.255,P<0.001).结论 A431细胞株高表达Gadd45α,靶向沉默Gadd45α表达能增强A431细胞株的侵袭和迁移能力.
肿瘤、鳞状细胞、RNA干扰、肿瘤侵润、细胞迁移分析、生长抑制和DNA损伤诱导45蛋白α
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2018-07-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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