体外诱导沙眼衣原体持续性感染对宿主细胞凋亡的调控

摘要：

目的 探讨阿奇霉素诱导持续性感染下沙眼衣原体对Hela229细胞凋亡的调控作用.方法 沙眼衣原体感染Hela229细胞22 h后,加入含0.08 mg/L阿奇霉素的DMEM培养液继续培养至感染48 h,构建持续性感染细胞模型,以不含阿奇霉素的DMEM培养液培养构建急性感染细胞模型.感染48 h后,去除阿奇霉素继续培养进行沙眼衣原体复活试验.免疫荧光和电镜检测技术验证持续性感染模型.将沙眼衣原体急性感染和持续性感染的Hela229细胞用星状孢子素处理4h诱导凋亡后,用Hoechst 33258染色和膜联蛋白V-碘化丙锭流式细胞仪检测宿主细胞凋亡,以未感染Hela229细胞为对照.结果 加入阿奇霉素后,沙眼衣原体感染的细胞内形成异形包涵体,其内为畸形网状体.去除阿奇霉素继续培养至96 h,沙眼衣原体包涵体内见具有感染性的原体.Hoechst染色显示,经星状孢子素诱导细胞凋亡,持续性感染的细胞染色质疏松,而无沙眼衣原体感染的细胞染色质浓缩.在感染24 h时诱导凋亡,持续性感染组和急性感染组细胞凋亡率分别为45.567％±2.631％和38.567％±1.701％,两者差异有统计学意义(t=2.686,P=0.028),持续性感染组与未感染组(69.800％±2.835％)差异有统计学意义(t=8.187,P＜0.001).在感染48 h时诱导凋亡,持续性感染和急性感染组细胞凋亡率分别为46.700％±5.257％和61.767％±1.815％,两者差异有统计学意义(t=5.781,P＜0.001);持续性感染组与未感染组(68.667％±3.156％)差异有统计学意义(t=7.421,P＜ 0.001).结论 阿奇霉素诱导沙眼衣原体持续性感染可调控宿主细胞凋亡,且作用持久至48 h.

关键词：沙眼衣原体、叠氮红霉素、治疗失败、细胞凋亡、持续性感染

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资助基金：广东省自然科学基金2015A030313895;广东省医学科学技术研究基金A2016563Natural Science Foundation of Guangdong Province of China2015A030313895;Medical Science and Technology Research Foundation of Guangdong ProvinceA2016563

在线出版日期：2018-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：347-351