喜树碱对HaCaT细胞低氧诱导因子1α表达的影响

摘要：

目的 观察喜树碱对低氧(2％O2)培养下HaCaT细胞低氧诱导因子1 α(HIF-1α)表达的影响,探讨外用喜树碱治疗银屑病可能的作用机制.方法 将HaCaT细胞分为实验组和溶媒组(对照组),实验组为喜树碱+ DMEM培养液,终浓度分别为12.5、25、50、100、200 nmol/L;溶媒组为含二甲基亚砜(DMSO)的DMEM培养液.不同浓度的喜树碱作用于HaCaT细胞12、24、48、72 h,CCK8法检测细胞增殖;用以上浓度处理低氧诱导12h的HaCaT细胞,Western印迹检测细胞HIF-1α蛋白的表达.将HaCaT细胞分为常氧组和低氧组,每组内再分喜树碱干预组(100 nmol/L)和非干预组(溶媒对照组),培养12h后实时荧光定量PCR检测HIF-1α mRNA的相对表达.统计分析采用SPSS16.0软件进行Levene”s test、单因素方差分析、Dunnett-t检验和析因分析.结果 不同浓度喜树碱作用12、24、48、72 h后对HaCaT细胞的增殖有抑制作用,呈浓度和时间依赖关系;200 nmol/L喜树碱作用12h,100、200 nmol/L喜树碱作用24 h细胞增殖抑制率分别为(17.66±6.46)％、(33.11±4.63)％、(56.31±1.69)％,与同时段溶媒对照组间差异有统计学意义(均P＜0.05).低氧诱导12h,25、50、100、200 nmol/L喜树碱处理后HIF-1α蛋白表达分别为0.348±0.065、0.261±0.112、0.115±0.043、0.045±0.024,与溶媒组(1.445±0.329)比较,差异有统计学意义(均P＜0.05).喜树碱干预(100 nmol/L)与非干预的HIF-1αmRNA表达(△Ct值)分别为:常氧组-5.575±0.29、-5.451±0.21;低氧组-6.543±0.57、-6.203±0.31;低氧较常氧条件下HaCaT细胞HIF-1α mRNA的表达下调,差异有统计学意义(F=29.856,P＜ 0.05);喜树碱干预和非干预组间HaCaT细胞HIF-1α mRNA的表达在常氧和低氧条件下差异无统计学意义(F=1.667,P＞ 0.05).结论 100 nmol/L喜树碱可抑制HaCaT细胞HIF-1α蛋白表达,对HIF-1αmRNA的表达水平无明显影响.

关键词：银屑病、喜树碱、缺氧诱导因子1、细胞低氧、HaCaT细胞

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资助基金：南京军区医学科技创新项目12Z03;全军医学科技青年培育项目13QNP045

在线出版日期：2015-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：400-403