反向斑点杂交技术快速鉴定泌尿生殖道致病性支原体的研究

摘要：

目的 建立PCR反向斑点杂交方法(PCR-RDB)快速鉴定泌尿生殖道常见致病性支原体.方法 以4种支原体[微小脲原体(Up)、解脲脲原体(Uu)、生殖支原体(Mg)、人型支原体(Mh)]的16SrRNA基因为靶序列设计通用引物和探针,将4种特异的寡核苷酸探针固定于尼龙膜上.利用巢式PCR扩增Up、Uu、Mg和Mh,扩增产物变性后与各特异性探针进行杂交、显色并分析结果,并对检测体系的敏感性、特异性进行测试.同时检测分析60例临床拭子标本.结果 4种特异性探针只与相应的支原体DNA杂交,与其他病原体无交叉反应,其敏感性是1 CFU.60例临床拭子标本PCR-RDB方法共筛选出支原体阳性19例,其中3例为支原体混合感染的标本(Up+Uu 2例,Uu+Mg 1例).结论 该方法可快速、敏感、准确地鉴定引起泌尿生殖道感染的致病性支原体.

关键词：支原体属、寡核苷酸探针、聚合酶链反应

所属期刊栏目：42

分类号：R75(皮肤病学与性病学)

资助基金：广东省科委资助项目2008B0315

在线出版日期：2010-01-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：814-816