战骨ISSR-PCR反应条件的筛选与优化

摘要：

采用正交和单因素试验设计方法,研究Mg2+、dNTP、Taq DNA聚合酶、引物、模板DNA、退火温度及循环次数对ISSR-PCR扩增效果的影响,建立并优化战骨ISSR-PCR反应体系和程序,即25μl的体系中合Mg2+ 2.0 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,TaqDNA聚合酶1.0U,引物0.8μmol/L,模板DNA 50 ng,10×Buffer 2.5μl.退火温度、循环次数分别为52℃、45次.结论:结合正交和单因素试验可快速建立ISSR-PCR反应体系.该体系稳定、可靠,可用于战骨遗传多样性分析.

关键词：战骨、ISSR-PCR、正交设计、单因素试验

所属期刊栏目：30

分类号：R282.7(中药学)

资助基金：广西科技攻关项目桂科攻0815005-2-3;广西区基金项目桂科自0991227;广西科技创新能力建设项目桂科能0992028-10

在线出版日期：2011-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：31-34