补肾活血汤石油醚提取物对BMSCs迁移过程中Wnt5a/PKC通路的影响

摘要：

目的 探讨补肾活血汤(熟地黄、菟丝子、补骨脂,等)石油醚提取物对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的迁移作用及相关机制.方法 全骨髓贴壁法培养BMSCs,取第3代细胞用于实验,采用流式细胞仪检测细胞表面抗原,细胞划痕、Transwell实验观察补肾活血汤石油醚提取物0、25、50、100、200μg/mL剂量组的细胞迁移能力,Western blot和RT-PCR检测Wnt5a、蛋白激酶C(PKC)表达情况.结果 第3代BMSCs表面抗原CD29、CD90、CD44表达阳性,而CD45表达阴性;细胞划痕6h及12h后,药物各剂量组细胞迁移速度明显高于空白组(P＜0.05,P ＜0.01);Transwell实验中100 μg/mL补肾活血汤石油醚提取物为促细胞迁移最佳剂量,差异有统计学意义(P＜0.01);RT-PCR结果显示与空白对照组比较,药物各剂量组的Wnt5a mRNA水平均升高(P＜O.05,P＜0.01),而与空白对照组的PKC mRNA水平比较,药物只有100μg/mL剂量mRNA表达水平升高(P＜0.01);Western blot结果表明药物组各剂量的Wnt5a、PKC蛋白表达较空白对照组都明显升高(P＜0.01),均且以100 μg/mL剂量最高(P＜0.01).结论 补肾活血汤石油醚提取物可以促进BMSCs体外迁移,其作用机制可能与Wnt5a/PKC信号通路有关.

关键词：补肾活血汤、信号通路、体外迁移、骨髓间充质干细胞、Wnt5a、PKC

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分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金81473699,81273783;广东省自然科学基金2016A030310289

在线出版日期：2018-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2462-2468