10.3760/cma.j.cn112338-20220819-00718
不同来源产气荚膜梭菌β 2毒素编码基因的PCR检测方法建立及遗传多态性分析
目的:建立并优化产气荚膜梭菌β
2毒素编码基因(
cpb
2)和非典型
cpb
2(
aty-cpb
2)的PCR检测方法,分析2016-2021年中国9个地区
cpb
2流行特征和遗传多态性。
方法:使用PCR方法对188株产气荚膜梭菌菌株的
cpb
2进行检测,通过全基因组测序获取
cpb
2序列以分析其遗传多态性,使用Mega 11、Makeblastdb软件对110株产气荚膜梭菌所携带的
cpb
2构建系统发育树并建库,通过Blastn算法比对后得出
cpb
2两种不同基因型,即共有
cpb
2(
con-cpb
2)和
aty-cpb
2之间的序列相似性。
结果:针对产气荚膜梭菌
cpb
2和
aty-cpb
2建立及改进的PCR检测方法的特异性好。
cpb
2的PCR检测结果与全基因组测序结果高度一致(Kappa=0.946,
P<0.001)。来自中国9个地区的菌株中共有107株菌携带
cpb
2,94株A型菌株携带
aty-cpb
2,6株A型菌株携带
con-cpb
2,7株F型菌株携带
aty-cpb
2。两种不同基因型的
cpb
2核苷酸序列相似性为68.97%~70.97%,相同基因型的
cpb
2核苷酸序列相似性为98.00%~100.00%。
结论:本研究建立了特异性好、一致性高的
cpb
2的PCR检测方法,并针对既往检测
aty-cpb
2的PCR方法特异性差的缺陷进行了改进。
cpb
2以
aty-cpb
2为主且
cpb
2的不同基因型之间核苷酸序列差异大。
产气荚膜梭菌、β 2毒素 、遗传多态性
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国家重点研发计划2021YFC2301000;传染病预防控制国家重点实验室自主研究课题2021SKLID207;National Key Research and Development Program of China2021YFC2301000;Open Project Supported by State Key Laboratory of Infectious Disease Prevention and Control2021SKLID207
2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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