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10.3760/cma.j.cn112338-20220819-00718

不同来源产气荚膜梭菌β 2毒素编码基因的PCR检测方法建立及遗传多态性分析

引用
目的:建立并优化产气荚膜梭菌β 2毒素编码基因( cpb 2)和非典型 cpb 2( aty-cpb 2)的PCR检测方法,分析2016-2021年中国9个地区 cpb 2流行特征和遗传多态性。 方法:使用PCR方法对188株产气荚膜梭菌菌株的 cpb 2进行检测,通过全基因组测序获取 cpb 2序列以分析其遗传多态性,使用Mega 11、Makeblastdb软件对110株产气荚膜梭菌所携带的 cpb 2构建系统发育树并建库,通过Blastn算法比对后得出 cpb 2两种不同基因型,即共有 cpb 2( con-cpb 2)和 aty-cpb 2之间的序列相似性。 结果:针对产气荚膜梭菌 cpb 2和 aty-cpb 2建立及改进的PCR检测方法的特异性好。 cpb 2的PCR检测结果与全基因组测序结果高度一致(Kappa=0.946, P<0.001)。来自中国9个地区的菌株中共有107株菌携带 cpb 2,94株A型菌株携带 aty-cpb 2,6株A型菌株携带 con-cpb 2,7株F型菌株携带 aty-cpb 2。两种不同基因型的 cpb 2核苷酸序列相似性为68.97%~70.97%,相同基因型的 cpb 2核苷酸序列相似性为98.00%~100.00%。 结论:本研究建立了特异性好、一致性高的 cpb 2的PCR检测方法,并针对既往检测 aty-cpb 2的PCR方法特异性差的缺陷进行了改进。 cpb 2以 aty-cpb 2为主且 cpb 2的不同基因型之间核苷酸序列差异大。

产气荚膜梭菌、β 2毒素 、遗传多态性

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国家重点研发计划2021YFC2301000;传染病预防控制国家重点实验室自主研究课题2021SKLID207;National Key Research and Development Program of China2021YFC2301000;Open Project Supported by State Key Laboratory of Infectious Disease Prevention and Control2021SKLID207

2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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0254-6450

11-2338/R

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2023,44(4)

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