siRNA干扰技术联合高压氧对大鼠脑出血后脑水肿及凋亡的影响

摘要：

目的 观察靶向水通道蛋白4(AQP-4)的小RNA(siRNA)干扰技术联合高压氧对实验大鼠脑出血后脑水肿及凋亡的影响. 方法 将大鼠随机分为对照组、高压氧组、AQP-4 siRNA组及联合治疗组,每组24只;凝血酶Ⅶ注射诱发尾状核建立脑出血模型,构建沉默AQP-4 mRNA表达的siRNA质粒;提取第3天脑组织总RNA和总蛋白,用RT-PCR法检测AQP-4的mRNA表达水平;干湿比重法和Evans蓝法测定脑组织含水量及血脑屏障通透性改变;Annexin V及TUNEL法检测脑细胞凋亡率,Western blot法检测AQP 4、基质金属蛋白2、9(MMP-2、MMP-9),B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl 2),半胱天冬酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平;第3天给予实验动物神经功能缺陷评分(mNSS). 结果 AQP-4 siRNA减轻脑出血后脑水肿及沉默AQP-4方面优于高压氧(P＜0.05),二者联合应用在脑出血后降低脑水肿程度方面获最佳效果(P＜0.05);与对照组比较各组均抑制神经细胞凋亡,以联合组(4.24±0.04)％最明显(F=13.76,P=0.001);高压氧联合AQP-4 siRNA能降低AQP-4,MMP-2、MMP-9,Caspase-3表达(P＜0.05),而增加Bcl-2表达(P＜0.01).神经功能缺陷评分较对照组均有改善(P＜0.05),以联合组(4.7±1.1)分最理想(F=7.21,P=0.013). 结论 靶向siRNA干扰技术联合高压氧可有效减轻脑出血后脑水肿并抑制神经细胞凋亡,促进神经功能恢复,其机制可能与减少AQP 4,MMP-2、MMP-9,caspase 3表达,增加Bcl 2表达有关.

关键词：脑出血、RNA干扰、高压氧、水通道蛋白-4

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分类号：R74;R-3

资助基金：国家自然科学基金项目81201973,81502654;泰山医学院附属莱芜医院科研项目YYLX2013016,YYLX2013019,YYLX2014013,YYLX2015028National natural science foundation of China81201973,81502654;College Foundation of Laiwu Hospital Affiliated to Taishan Medical CollegeYYLX2013016,YYLX2013019,YYLX2014013,YYLX2015028

在线出版日期：2017-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1010-1014