5-氮杂-2'-脱氧胞苷联合曲古抑菌素A对人胃癌细胞的存活率及E-cadherin甲基化的影响

摘要：

目的 探讨5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-dC)联合曲古抑菌素A(TSA)对分化程度不同的人胃腺癌细胞株MKN-45、SGC-7901与MGC-803的细胞存活率和抑癌基因E-cadherin启动子区甲基化以及mRNA表达的影响. 方法 培养3个细胞株,实验分为空白对照组、5-Aza-dC组(10μmol/L 5-Aza-dC处理72 h)、TSA组(1μmol/L TSA处理48 h)和联合组(10μmol/L5-Aza-dC处理24 h后,再加入1μmol/L TSA处理48 h).观察三株细胞形态的改变,用台盼蓝染色法检测活细胞数.采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测3株细胞的E-cadherin基因启动子区甲基化水平与mRNA表达. 结果 MKN-45细胞中,5-Aza-dC组、TSA组与联合组的细胞存活率分别为(73.03±1.92)％、(64.48±1.28)％和(52.44±1.45)％;SGC-7901细胞分别是(63.33±1.92)％、(52.15±1.44)％和(44.44±1.45)％;MGC-803细胞分别是(57.33±1.61)％、(45.48±1.29)％和(33.11±1.12)％.3株细胞的单药组的细胞存活率均减少,联合组分别比5-Aza-dC和TSA处理组明显下降(均P＜0.05).E-cadherin基因启动子区甲基化水平,5-Aza-dC组、TSA组及联合组的甲基化产物与空白对照组相比较均降低,其中联合组比单药组降低明显.空白对照、5-Aza-dC、TSA及二者联合处理组的E-cadherin的mRNA相对表达量在MKN-45细胞株中分别为0.17±0.01、0.32±0.01、0.29±0.02和0.57±0.02;在SGC-7901细胞株中分别为0.22±0.01、0.46±0.01、0.43±0.01和0.61±0.01;在MGC-803细胞株中分别为0.24±0.02、0.49±0.01、0.44±0.01和0.73±0.01.在单药处理组中比空白对照组升高(P＜0.05),并且二药联合组比单药组升高(P＜0.01). 结论 5-Aza-dC和TSA单独处理均降低分化程度不同的胃癌细胞存活率,使E-cadherin基因的甲基化水平下降,并增加其mRNA表达.3株细胞的联合组的影响效果更明显,两药之间具有协同作用.其中MKN-45的存活率,甲基化水平和mRNA表达的改变均较SGC-7901与MGC-803明显.

关键词：胃肿瘤、DNA甲基化、甲基转移酶类、曲古抑菌素A、基因、肿瘤抑制

所属期刊栏目：33

分类号：R735.2;R285.5;R329.26

资助基金：国家自然科学基金;安徽省国际科技合作项目;安徽省科技计划

在线出版日期：2014-06-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：534-538