α-2-巨球蛋白在人胚肺二倍体成纤维细胞衰老过程中的作用

摘要：

目的了解α-2-巨球蛋白(A2M)对人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS细胞)衰老过程的影响. 方法将正、反义真核表达载体,经脂质体(lipofectin)介导,转染年轻2BS细胞,分别获得正、反义转染细胞.经Southern及Northern印迹验证后,测定正、反义转染细胞的衰老相关指标,再用Western印迹法检测转染细胞中p16、p21的变化. 结果转染的外源性A2M cDNA片段已完全整合到基因组中.与对照2BS/neo(空载体)细胞和正常细胞相比,正义A2M表达载体转染2BS细胞得到的稳定细胞(2BS/A2Ms细胞)生长更为迅速,S期和M期的比例略高于对照2BS/neo细胞和正常细胞组.衰老相关的β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色阳性率约为55.4%,而且细胞寿限较正常细胞和对照细胞组略有延长,但无统计学意义(P＞0.05).与之相反,反义A2M表达载体转染2BS细胞得到的稳定细胞(2BS/A2Ma细胞)较对照和正常细胞组生长更为缓慢,S期和M期的比例略低,SA-β-Gal染色阳性率约为72.3%,细胞形态扁平、增大,表现为衰老细胞的特征,细胞寿限略短于对照和正常细胞组,但也无统计学意义(P＞0.05).此外发现2BS/A2Ms细胞的生长速率、S期和M期的比例、细胞寿限均明显高于2BS/A2Ma细胞(P＜0.01).比较正、反义转染细胞最大传代次数差异有统计学意义(P＜0.05).转染细胞中p16、p21的表达变化并无统计学意义. 结论α-2-巨球蛋白延缓2BS细胞衰老作用甚微,且不经过p16、p21基因起作用.

关键词：巨球蛋白类、成纤维细胞

所属期刊栏目：24

分类号：R5(内科学)

资助基金：中国科学院资助项目30271432与30371561

在线出版日期：2005-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：858-861