10.3877/cma.j.issn.2096-0263.2023.04.006
LncRNA NEAT1靶向miR-185-5p调控骨肉瘤的机制研究
目的:探究LncRNA NEAT1对骨肉瘤细胞的调控机制。方法:采用qRT-PCR检测正常人成骨细胞和骨肉瘤细胞中LncRNA NEAT1的差异表达,构建siRNA-NEAT1#1、siRNA-NEAT1#2、siRNA-NEAT1#3转染至骨肉瘤细胞并验证其转染效率。通过CCK-8法、流式细胞术、Transwell实验分别检测细胞活力、凋亡、迁移和侵袭能力。使用核质分离实验验证NEAT1定位。利用生物信息学预测网站预测LncRNA NEAT1的靶基因,继而采取双荧光素酶精准靶点验证实验。miR-185-5p inhibitor和siRNA-NEAT1共同转染至骨肉瘤细胞中验证LncRNA NEAT1通过海绵结合靶基因miR-185-5p对骨肉瘤细胞生物学行为进行调控。结果:LncRNA NEAT1在骨肉瘤组织及细胞中高表达,在骨肉瘤细胞中敲低LncRNA NEAT1表达抑制细胞活力、迁移、侵袭,促进细胞凋亡,LncRNA NEAT1竞争性结合miR-185-5p,同时敲低骨肉瘤细胞LncRNA NEAT1与miR-185-5p的表达部分逆转了以上细胞行为。结论:敲低miR-185-5p的表达水平可部分逆转siRNA-NEAT1对骨肉瘤细胞活力的抑制作用
骨肉瘤、LncRNA NEAT1、miR-185-5p、细胞活力
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衡水市科技计划项目2020014068Z
2023-09-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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