10.3969/j.issn.1673-8705.2008.03.002
抗内皮细胞抗体介导的内皮细胞损伤机制
目的 探讨抗内皮细胞抗体(antiendothelial cell antibody,AECA)对内皮细胞凋亡的影响及重组α-烯醇化酶对内皮细胞凋亡的阻断作用.方法 以EA.hy926细胞(内皮细胞永生细胞)提取物蛋白为抗原,采用免疫印迹法检测并筛选47 000-AECA阳性患者血清,用蛋白G亲和层析法纯化IgG,在体外诱导内皮细胞凋亡,观察重组α-烯醇化酶对凋亡的阻断作用.结果 含47 000-AECA IgG在体外可诱导内皮细胞凋亡,荧光染色可见明显的核形态变化及典型的凋亡小体:含47 000-AECA系统性红斑狼疮患者的IgG作用于EA.hy926细胞24、48和72小时后,凋亡率均明显高于相同剂量正常人IgG;作用EA.hy926细胞的凋亡率;而经重组α-烯醇化酶预处理后EA.hy926细胞凋亡率则明显降低.含47 000-AECA IgG作用于EA.hy926细胞8小时后,Annexin V+细胞数明显增加,并随IgG作用时间和浓度的增加而升高;而经重组α-烯醇化酶预处理的含47000-AECAIgG作用于EA.hy926细胞后,Annexin V+细胞有所减少.结论 AECA在体外可诱导内皮细胞凋亡,引起内皮细胞损伤;重组α-烯醇化酶可部分阻断47000-AECA体外诱导内皮细胞凋亡的作用,α-烯醇化酶是AECA识别的自身抗原之一.
内皮细胞、抗内皮细胞抗体、α-烯醇化酶、细胞凋亡
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R593.2;Q944.42(全身性疾病)
国家自然科学基金30400411
2009-08-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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