结核分枝杆菌诱导的核转录因子C／EBPβ和PU．1通过等位基因-31C＞T调控IL-1β基因启动子活性

摘要：

目的：探讨IL-1β等位基因-31 C＞T对结核分枝杆菌诱导的核转录因子C／EBPβ和PU．1与启动子结合活性的影响。方法首先，采用凝胶电泳迁移率电泳实验（ EMSA）证明C／EBPβ和PU．1可以结合在IL-1β启动子-31位置区域。然后，构建表达PU．1和C／EBPβ的真核载体，协同不同等位基因型IL-1β启动子荧光素载体共同转染至HeLa细胞，采用蛋白免疫印迹实验验证PU．1和C／EBPβ是否成功表达，利用双荧光素酶系统分析在不同转染条件下IL-1β等位基因-31 C＞T对启动子活性的影响。最后，利用慢病毒介导的RNA干扰技术（ siRNA）反向验证结核分枝杆菌诱导的C／EBPβ和PU．1对IL-1β基因的转录调控。所有统计分析使用GraphPad Prism 5．0软件完成。结果EMSA证实核转录因子C／EBPβ和PU．1均可以结合在IL-1β启动子-31位置区域；过表达C／EBPβ或者PU．1均可以增加IL-1β启动子活性，尤其以增强-31 T等位基因启动子活性最为明显（ t＝22．33和7．98，P＜0．01），在共表达C／EBPβ和PU．1时两者具有显著的协同效应；利用siRNA 单一或者同时沉默C／EBPβ和PU．1基因后，IL-1β启动子活性显著降低（q＝5．79、6．23和11．66，P＜0．01）。结论IL-1β等位基因-31 C＞T通过影响结核分枝杆菌诱导的核转录因子C／EBPβ和PU．1与启动子的结合活性，进而调控IL-1β基因转录水平。

关键词：白细胞介素1β、等位基因、核转录因子、启动子、结核分枝杆菌

所属期刊栏目：9

分类号：R73;R74

资助基金：国家自然科学基金81501714；广东省自然科学基金2014A030313789；深圳市科技计划项目JCYJ20140411111718166@@@@ National Natural Science Foundation of China 81501714； Natural Science Foundation of Guangdong 2014A030313789； Shenzhen Scientific and Technological Project JCYJ20140411111718166

在线出版日期：2016-06-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：180-185