一种新型抗HIV-1药物筛选方法的建立

摘要：

目的 用细胞共培养和流式细胞仪检测建立新型抗HIV-1药物筛选方法,并判断这种方法在筛选抗HIV-1药物中的应用前景.方法 把JLTRG细胞和H9/HTLV-ⅢB细胞按照不同比例共培养24,48,72和96 h.在荧光显微镜下观察细胞绿色荧光强度和密度,同时用流式细胞仪测定绿色荧光的表达,并确定培养体系中最佳细胞比例和培养时间.通过选出的最佳条件结合药物半衰期检测恩夫韦肽(T20)和依非韦伦(EFV)的有效性及药物半数抑制量(IC50).采用HIV-1 P24抗原荧光定量PCR法检测病毒载量,并采用Spearman秩相关性分析法判断其与药物浓度及平均荧光强度之间的相关性.结果 实验结果显示,JLTRG细胞与H9/HTLV-ⅢB细胞按照10∶1的细胞数量比例共培养72 h为最佳培养比例和时间.以T20和EFV对共培养体系进行验证,结果显示随着T20和EFV浓度的改变,共培养体系中JLTRG细胞感染HIV-1的程度不同,其IC50分别为10 nmol/L和5 nmol/L.T20和EFV药物浓度与平均荧光强度以及病毒载量呈负相关(r=-1,-0.986和-1,-1,P＜0.01);平均荧光强度与病毒载量呈正相关(r=0.986和1,P＜0.01).结论 本研究建立的新型抗HIV-1药物筛选方法具有耗时短、操作方便等优点,可为抗HIV-1药物的筛选提供新的选择.

关键词：抗HIV药、药物筛选试验、流式细胞术、逆转录聚合酶链反应、半数抑制浓度

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分类号：Q948.12+2.1;S718.54+1;R735.1

资助基金：江苏省自然科学基金BK20130271

在线出版日期：2014-09-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：328-332