丙型肝炎抗体Eu3+、Sm3+双标记分析法的建立及应用

摘要：

目的 建立能同时检测抗HCV-免疫球蛋白(Ig)M和抗HCV-IgG抗体的时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)法.方法 采用HCV重组抗原包被,制备Eu3+标记抗人IgM和Sm3+标记抗人IgG抗体;采用间接法建立HCV-IgM和HCV-IgG TRFIA并行优化和方法学考核.用百分位数法单侧95％计算阳性判定(CO)值.结果 以1个样本检测值/阳性判定值(S/CO)为单位,HCV-IgM和HCV-IgG的检测灵敏度分别为0.06和0.15 S/CO.分别将HCV-IgM和HCV-IgG强阳性的标本从1:12.5倍比稀释到1:51200,HCV-IgM在1:12.5～1:12800呈较好线性反应,HCV-IgG在1:25～1:6400呈较好线性反应.HCV-IgM和HCV-IgG的平均批内CV分别为3.37％和3.66％,平均批间CV分别为6.52％和6.75％.用酶联免疫吸附测定法作为参照,检测HCV阳性标本和阴性标本各20例,两者HCV-IgM阳性符合率为100.0％(20/20),阴性符合率为90.0％(18/20),总符合率为95.0％(38/40);HCV-IgG相应数据分别为100.0％(20/20)、95.0％(19/20)和97.5％(39/40).试剂盒于37℃ 放置7 d检测,荧光计数值分别下降11.1％和9.5％,稳定性能良好.结论 建立的HCV-IgM和HCV-IgG TRFIA双标记分析法1次测量可同时得到HCV-IgM和HCV-IgG结果,是一种宽量程、高特异性、高灵敏度、稳定性好的方法.

关键词：肝炎抗体、丙型、荧光免疫测定、铕、钐

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资助基金：南京医科大学重点项目JMUZD057;无锡市"科教强卫工程"项目ZDRC006 Key Project of Nanjing Medical UniversityJMUZD057;Invigorating Health Care through Science, Technology and Education Project of WuxiZDRC006

在线出版日期：2018-11-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：677-680