10.3760/cma.j.issn.0253-9780.2009.04.016
CA242高灵敏时间分辨荧光免疫分析及其初步应用
目的 采用时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)建立高灵敏的恶性肿瘤相关糖类抗原(CA)242的快速全自动检测方法 并进行初步应用.方法 以抗CA242单克隆抗体601#包被96孔微孔板,以Eu3+-N2-[p-异氰酸苄基]-二乙烯三胺四乙酸标记抗CA242单克隆抗体242#,发光增强系统为以β-二酮体为主的增强液.采用平衡饱和法建立CA242 TRFIA,采用Auto DELLA1235系统考核CA242 TRFIA,并进行健康人和胃癌患者血清样本的检测.结果 该方法 的批内和批间CV分别为2.92%和5.36%,平均回收率为98.75%,灵敏度为0.2 kU/L,可测范围为0.2~200 kU/L,最高浓度点计数的20%、50%、80%对应的效应点值(ED20、ED50、ED80)分别为25.2 kU/L、53.3 kU/L和112.5 kU/L.CASO、CA19-9对CA242分别有15%和32%的交叉反应,癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、CA125对CA242 TRFIA均无交叉反应.Eu3+标记242#抗体于-20℃下保存6个月免疫反应性基本无损,同批试剂连续6个月应用分析结果 稳定,检测健康体格检查人员的血清,样品的平均值为(6.52±5.15)kU/L,建议阳性阈值为17 kU/L,临床结果 与酶联免疫吸附测定(ELISA)的结果 相符,r为0.916.116例胃癌患者血清CA242的阳性率为26.7%.结论 CA242 TRFIA的灵敏度高、稳定性好,可用于血清CA242含量的免疫测定.
荧光免疫测定、抗原、肿瘤相关、碳水化合物、消化系统肿瘤
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R4(临床医学)
江苏省自然科学基金BK020133;江苏省卫生厅科研项目H200856
2009-09-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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