miR-99a-mTOR在低氧调控人脐静脉内皮细胞增殖中的作用研究

摘要：

目的 探讨低氧对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelia cell,HUVEC)增殖的影响及调控机制.方法 HUVEC在不同氧浓度(1％、5％、21％O2),37℃5％ CO2培养24 h,WST-1法检测增殖.生物信息学预测miR-99a靶基因并利用双荧光素酶报告基因检测方法验证.Lipofectamine 2000将miR-99a mimics、miR-99a siRNA、哺乳类动物雷帕霉素受体(mammalian target ofrapamycin,mTOR) siRNA、mTOR cDNA转染HUVEC,低氧下继续培养.qRT-PCR检测miR-99a表达,RT-PCR及Western blot检测mTOR表达.结果 与常氧(21％ O2)相比,低氧(1％O2)显著抑制HUVEC增殖(33.3％±6.5％,P=0.004).低氧上调miR-99a表达[(1.94±0.24)倍,P=0.001],进而抑制HUVEC增殖.生物信息学及荧光素酶报告基因系统检测显示mTOR为miR-99a靶基因,低氧时miTR-99a抑制mTOR基因及蛋白水平表达.进一步研究显示低氧通过miR-99a-mTOR途径抑制内皮细胞增殖.结论 低氧处理明显抑制HUVEC增殖,其机制可能与miR-99a-mTOR途径有关.

关键词：低氧、miR-99a、哺乳类动物雷帕霉素受体、增殖

所属期刊栏目：24

分类号：S66;S65

资助基金：国家自然科学基金资助项目31650006;山东省自然科学基金面上项目ZR2016HM37National Natural Scierue Foundation Program of China31650006;Natural Science Foundation Program of ShandongZR2016HM37

在线出版日期：2017-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：130-134