人源抗创伤弧菌溶血素蛋白单链抗体的筛选及初步鉴定

摘要：

目的 从天然单链(scFv)大容量噬菌体抗体库中筛选特异性抗创伤弧菌溶血素蛋白(vibrio vulnificus haemolysin,VVH)的scFv并进行初步鉴定.方法 以表达纯化后的VVH为靶抗原,采用酸洗脱的方法从天然大容量噬菌体抗体库中筛选人源抗VVH噬菌体单链抗体,并将噬菌体抗体的上清梯度稀释后感染HB2151菌,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后获得抗VVH蛋白可溶性单链抗体,ELISA检测其与抗原结合活性,DNA序列测定鉴定抗体序列.结果 经过4轮筛选,共筛选到22株可以与VVH结合的噬菌体阳性克隆,其中8株获得可溶性表达,DNA序列分析表明获得3株可变区基因型不同的单链抗体.结论 利用大容量噬菌体抗体库筛选技术获得抗创伤弧菌溶血素蛋白的可溶性抗体,为创伤弧菌感染的治疗奠定了基础.

关键词：大容量噬菌体抗体库、创伤弧菌、溶血素蛋白、可溶性抗体

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资助基金：国家自然科学基金项目31170008,31400107;全军医药卫生科研基金项目06Z007 National Natural Science Foundation of China31170008,31400107;Army Medical Scientific Research Fund Projeat06Z007

在线出版日期：2016-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：137-140