高压氧对缺血再灌注肠黏膜上皮Caco-2细胞间紧密连接的影响

摘要：

目的 观察高压氧(HBO)对缺血再灌注(I/R)人类肠黏膜上皮Caco-2细胞间紧密连接(TJ)的影响.方法 培养单层人类大肠黏膜上皮细胞Caco-2,应用0.5 mmol/L丁基过氧化氢(t-buooh)诱导离体肠黏膜上皮细胞I/R损伤.按数字表法随机分为5组(每组8个培养孔):对照组(N组)、I/R组、HBO预处理(HBO-P)组、缺血期HBO干预(HBO-I)组、再灌注期HBO干预(HBO-R)组.采用跨膜电阻抗检测法(TEER)检测肠道黏膜上皮细胞间紧密连接的开放程度并评价其通透性.用Rt-PCR检测细胞间紧密连接蛋白ZO-1转录水平.结果 TEER阻值N组最高,其次为HBO-P组,再次为HBO-R组,最后为HBO-I组.N组与其他各组差异均有统计学意义(P＜0.01);HBO-P组阻值与I/R组、HBO-I组及HBO-R组的阻值比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);HBO-R组与I/R组、HBO-I组阻值比较差异有统计学意义(P＜0.05);L/R组高于HBO-I组,且差异有统计学意义(P＜0.05).ZO-I mRNA的Rt-PCR结果显示:与N组相比,其他各组ZO-1 mRNA含量均明显下降,且差异有统计学意义(P＜0.01);HBO-P组ZO-1 mRNA含量均高于L/R组、HBO-R组及HBO-I组(P＜0.01);HBO-R组ZO-1 mRNA含量高于I/R组和HBO-I组(P＜0.05);HBO-I组与I/R组ZO-1 mRNA含量接近,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 HBO干预具有保护单层Caco-2细胞TJ功能作用,抑制TJ开放,机制可能与维持TJ的骨架蛋白ZO-1有关.缺血期前和再灌注期给予HBO干预治疗显示有益结果,HBO预处理疗效最佳,缺血期给予HBO无效.

关键词：高压氧、缺血/再灌注损伤、紧密连接、Caco-2细胞、ZO-1

所属期刊栏目：22

资助基金：辽宁省自然科学基金项目20092137

在线出版日期：2015-06-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：105-109