人髌下脂肪垫干细胞的分离培养鉴定及初步研究

摘要：

目的 建立人髌下脂肪垫干细胞分离、培养和鉴定的平台,验证其可作为可靠的干细胞来源,并可作为细胞模型参与科学研究.方法 人髌下脂肪垫取自膝关节置换手术患者,经Ⅰ型胶原酶消化,在高糖Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM)内扩增,取P5代细胞用于检测其"干性"及三向分化能力.与微尺度支架结合,通过RT-PCR检测成骨基因的表达,应用最小显著性差异法进行组间两两比较,用于验证微尺度支架的成骨诱导特性.结果 人髌下脂肪垫干细胞具备间充质干细胞相关特性,包括黏附贴壁性;成脂肪、成软骨及成骨分化;表达相关表面标记,如分化抗原簇(CD)73、CD90和CD105;不表达造血细胞系的分子表面标记,如c-kit、CD14、CD11b、CD34、CD45、CD19、CD79和人白细胞抗原(HLA)-DR.本课题中人髌下脂肪垫来源干细胞成功作为一种干细胞模型,证明HaCG微尺度支架具备成骨诱导特性,表现为三组中成骨基因ALP、COL1、Runx2表达差异有统计学意义(分别为F=150,P<0.01;F=68,P<0.01;F=16,P<0.01).HaCG微尺度支架组高于纯明胶微尺度支架组及二维培养组,纯明胶微尺度支架组高于二维培养组(P值均小于0.05).结论 人髌下脂肪垫干细胞分离、培养和鉴定平台的建立,未来可作为细胞模型应用于多种不同实验.

关键词：脂肪组织、间质干细胞、细胞增殖、组织工程

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资助基金：国家自然科学基金81802204;山西省自然科学基金201801D221117

在线出版日期：2019-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：313-319