长链非编码RNA LINC00665在肝癌中的表达及对血管生成的影响和机制

摘要：

目的:探讨长链非编码RNA LINC00665在肝癌中的表达和对肝癌血管生成的调控作用及潜在分子机制。方法:收集2016年5月至2017年4月南京医科大学第一附属医院100例肝细胞癌患者的癌组织和相应的癌旁组织，并比较生存预后。实时定量聚合酶链反应检测LINC00665在肝癌组织和细胞中的表达。通过小管形成实验和鸡胚尿囊膜实验检测过表达LINC00665的Hep-3B肝癌细胞血管生成情况。生物信息学数据库预测LINC00665下游微RNA(miRNA)及靶基因，聚合酶链反应、Western印迹、双荧光素酶报告基因进一步检测LINC00665、miR-126-5p和血管内皮生长因子A(VEGFA)的关系。结果:LINC00665在肝癌组织中的表达(6.5±2.8)明显高于癌旁组织(4.8±3.1)，差异有统计学意义(
t＝4.12，
P<0.001)。100例肝癌患者根据LINC00665表达的中位数分组，LINC00665高表达组(
n＝50)的累积生存率低于LINC00665低表达组(
n＝50)，差异有统计学意义(χ
2＝3.79，
P＝0.008)。与LINC00665组(过表达LINC00665的Hep-3B肝癌细胞)共培养后，人脐静脉内皮细胞小管形成的长度(596.0±22.3)μm、数量(36.3±4.5)个，均高于与NC组(仅感染空载体的Hep-3B肝癌细胞)共培养的人脐静脉内皮细胞小管形成长度(127.0±13.5)μm和数量(9.3±1.5)个，差异均有统计学意义(
t＝31.15、9.82，
P<0.001、
P＝0.001)。鸡胚尿囊膜实验与小管形成实验结果一致。Western印迹检测LINC00665组VEGFA蛋白的相对表达高于NC组，差异有统计学意义(
t＝7.15，
P<0.001)。使用StarBase和DIANA数据库预测和筛选LINC00665下游miR-126-5p。使用StarBase数据库对LINC00665/miR-126-5p/VEGFA轴的结合位点进行预测。双荧光素酶报告基因实验结果中，与miR-126-5p模拟物共转染的LINC00665、VEGFA载体荧光强度均下降。
结论:LINC00665在肝癌中高表达，并且与肝癌患者的不良预后相关。LINC00665通过调控miR-126-5p/VEGFA轴促进肝癌的血管生成。

关键词：癌，肝细胞、RNA，长链非编码、血管生成

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资助基金：无锡市卫健委科研项目M202106、M202110;"太湖之光"科技攻关基金Y20222002;江苏省研究生实践创新计划基金SJCX22_0645;Wuxi Municipal Health CommissionM202106, M202110;Wuxi Science and Technology BureauY20222002;Postgraduate Research & Practice Innovation Program of Jiangsu ProvinceSJCX22_0645

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：687-693