神经纤毛以及类似透拉蛋白2对胆囊癌细胞增殖、迁移、细胞周期和凋亡的影响及相关机制研究

摘要：

目的:探讨神经纤毛以及类似透拉蛋白2(NETO2)对胆囊癌细胞增殖、迁移、周期和凋亡的影响及分子机制。方法:通过实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和免疫印迹法分别检测胆囊癌细胞系GBC-SD、ZJU-0430、NOZ中NETO2的mRNA及蛋白表达水平，利用质粒转染法构建NETO2过表达及敲减的稳转细胞株。通过细胞计数法(CCK-8)、克隆形成实验、细胞迁移实验、流式细胞术和免疫印迹法检测NETO2对胆囊癌细胞增殖、克隆形成能力、迁移、周期进程、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响，以及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B (PI3K/Akt)信号通路的变化。结果:成功构建NETO2基因过表达的胆囊癌GBC-SD及ZJU-0430细胞，NETO2基因敲减的NOZ细胞。在ZJU-0430、GBC-SD细胞过表达NETO2后，胆囊癌细胞的增殖及迁移能力提高；可促进细胞从G0/G1期向S期进展，并抑制细胞凋亡；细胞克隆数分别由(78.5±9.2)、(217.0±6.4)增加为(213.5±10.3)、(296.3±9.3)(
t＝10.98、6.51，
P＝0.008、0.023)；迁移细胞数分别由(100倍视野)(198.6±8.4)个、(233.3±11.0)个增加为(382.7±12.4)个、(379.0±7.3)个(
t＝16.98、16.85，均
P<0.001)；细胞总凋亡率由(29.7±0.9)%、(35.6±1.1)%降低为(19.2±0.5)%、(29.1±0.4)%(
t＝9.74、9.05，均
P<0.001)；EMT相关蛋白如N-钙粘蛋白、波形蛋白、锌指转录因子Snail、Slug表达上调，而E-钙粘蛋白表达下调；PI3K/Akt通路磷酸化蛋白p-PI3K及p-Akt表达上调，上述变化差异均具有统计学意义(均
P<0.05)。而敲减NETO2表达则导致相反的变化。
结论:NETO2通过调控PI3K/Akt信号通路影响EMT进程，从而促进胆囊癌细胞的增殖和迁移，促进癌细胞周期进程并抑制癌细胞凋亡。

关键词：胆囊肿瘤、神经纤毛以及类似透拉蛋白2、增殖、迁移、磷脂酰肌醇3激酶、蛋白激酶B、上皮间质转化

所属期刊栏目：29

在线出版日期：2023-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：357-363