10.3760/cma.j.cn113884-20211222-00424
长链非编码RNA MALAT1调控NEAT1对肝细胞癌增殖和侵袭的影响
目的 探索长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录物1(MALAT1)通过调控核富集转录物1(NEAT1)对人肝癌细胞外泌体分泌和肿瘤细胞增殖、侵袭的影响.方法 肝癌细胞HuH-7细胞敲低MALAT1表达(si-MALAT1)转染获得si-MALAT1组细胞,转染无意义的小干扰RNA(si-RNA)作为si-NC组,比较si-MALAT1组和si-NC组NEAT1表达、细胞增殖和侵袭能力的变化.过表达NEAT1载体的慢病毒(lv)与HuH-7细胞共培养72 h后获取NEAT1过表达细胞(lv-NEAT1组),感染空转载体的lv作为lv-control组,比较lv-NEAT1组和lv-control组外泌体相关基因表达差异.使用 lv-NEAT1 组细胞转染 si-MALAT1 获得 si-MALAT1+lv-NEAT1 组细胞,与 si-NC 组、si-MALAT1 组细胞比较外泌体分泌能力变化.将si-MALAT1组细胞与lv-NEAT1组细胞的外泌体共培养获得si-MALAT1+lv-NEAT1外泌体组细胞,将si-MALAT1组细胞与lv-control组细胞的外泌体共培养获得si-MALAT1+lv-control外泌体组,考察 si-MALAT1+lv-NEAT1外泌体组和 si-MALAT1+lv-control外泌体组细胞的增殖和侵袭功能.结果 与si-NC组相比,si-MALAT1组中NEAT1的相对表达量[(0.72±0.02)比(0.98±0.01)]、72 h 吸光度[(0.66±0.03)比(0.98±0.04)]、下室细胞数量[(88.33±7.26)比(147.70±13.62)]均降低,差异有统计学意义(P<0.05).与si-NC组相比,si-MALAT1组外泌体CD9、CD63表达减弱;而与si-MALAT1组相比,si-MALAT1+lv-NEAT1组外泌体CD9、CD63表达增加.与 si-MALAT1+lv-control外泌体组相比,si-MALAT1+lv-NEAT1外泌体组吸光度[(0.97±0.03)比(0.74±0.05)]和下室细胞数量[(132.70±7.36)比(98.33±6.01)]均增加,差异有统计学意义(P<0.05).lv-NEAT1组外泌体相关基因HSPA8、SLC3A2、SLC7A5的相对表达量分别为(5.53±0.31)、(0.32±0.07)、(0.77±0.45),与 lv-control 组表达水平(0.98±0.15)相比,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 MALAT1可通过调控NEAT1改变肝癌细胞外泌体分泌功能,NEAT1可改变外泌体相关基因的表达,进而促进了肝癌细胞的增殖和侵袭.
癌、肝细胞、RNA、外泌体、肺腺癌转移相关转录物1、核富集转录物1
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R735.7;R394.2;R512.62
昆明市科技计划省级放管服科研重点项目2019-1-C-25318000002252
2022-05-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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