自噬调控Sprague-Dawley大鼠梗阻性黄疸肝损伤机制研究

摘要：

目的:探讨自噬对Sprague-Dawley(SD)大鼠梗阻性黄疸肝损伤的影响及其机制。方法:健康雄性SD大鼠35只，SPF级，6~8周龄，200~300 g，分为5组：假手术组(单纯游离胆总管，不结扎，腹腔内注射生理盐水)、胆总管结扎(OJ)组(游离胆总管，并双重丝线结扎，腹腔内注射生理盐水)、OJ+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、OJ+雷帕霉素(Rapamycin)组和OJ+3-MA+VX-765组，每组7只。HE染色观察肝脏组织学变化。免疫组化染色检测自噬相关蛋白Atg5表达水平。全自动生化仪检测肝功能。酶联免疫吸附试剂盒检测血清白细胞介素(IL)-18水平。蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白水平及内质网应激相关凋亡通路。结果:通过免疫组化染色，OJ组自噬相关蛋白Atg5相对表达量较假手术组增加[(5.0±1.0)比(2.8±1.3)]，差异有统计学意义(
t＝-3.00，
P<0.05)。与假手术组比较，OJ组自噬活性增加，半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1/p-65及炎症因子IL-18水平升高，同时内质网发生应激并诱导其相关性凋亡。应用自噬抑制剂3-MA后，与OJ组比较，OJ+3-MA组中Caspase-1/p-65蛋白水平及炎症因子IL-18水平增加，同时肝损伤加重；而应用自噬激动剂Rapamycin后，与OJ组比较，OJ+Rapamycin组中Caspase-1/p-65蛋白水平及炎症因子IL-18水平下降，同时肝损伤减轻。应用Caspase-1特异性阻断剂VX-765后，与OJ+3-MA组比较，OJ+3-MA+VX-765组中Caspase-1/p-65蛋白水平及炎症因子IL-18水平下降，同时肝损伤减轻。
结论:胆总管结扎后，诱导内质网应激相关性凋亡及激活自噬。活化的自噬减轻SD大鼠梗阻性黄疸肝损伤，可能与抑制Caspase-1/p-65炎症通路相关。

关键词：自噬、黄疸，阻塞性、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶、肝损伤

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资助基金：河南省高等学校重点科研项目19B320039、20A320047;河南省医学科技攻关计划联合共建项目LHGJ20190028;Key Scientific Research Project of Colleges and Universities in Henan Province19B320039, 20A320047;Joint Construction Project of Medical Science and Technology Research Plan of Henan ProvinceLHGJ20190028

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：127-132