Tspan8过表达与肝癌上皮间变及转移的关系

摘要：

目的 探讨四跨膜蛋白Tspan8表达与肝癌转移、上皮间变的关系及其机制.方法 利用前期构建的TSPAN8 shRNAs慢病毒质粒并筛选稳转细胞株MHCC97-H-LV-GFP-shRNA-Tspan8,沉默Tspan8基因表达.WST法检测细胞增殖变化;蛋白印迹法检测基质金属蛋白酶12表达改变;应用Transwell检测细胞侵袭能力变化;5.0×106肝癌细胞肝内注射行体内实验,检测肿瘤生长及肺转移情况.在层黏蛋白-5(laminin-5)作用于肝癌细胞株MHCC97-H-Mock和MHCC97-H-shRNA-Tspan8两天后,观察2组细胞形态差异,是否发生EMT改变并检测上皮及间质分子标志物.进一步应用免疫共沉淀和荧光分析Tspan8可否与整合素α6形成复合物.结果 体内外实验显示,与Tspan8-RNA干扰的MHCC-97H细胞(MHCC97-H-shRNA-Tspan8)比较,Tspan8高表达的肝癌细胞MHCC-97H和对照组MHCC97-H-Mock(LV-GFP)增殖侵袭能力、成瘤生长及肝癌肺转移等方面明显增强(P＜0.05).MHCC97-H-shRNA-Tspan8细胞中MMP-12表达抑制明显,细胞侵袭能力明显下降.进一步的研究显示:在层黏蛋白-5的诱导下四跨膜蛋白Tspan8可与α6结合并诱导高表达肝癌细胞MHCC97-H发生上皮间质转化,而在RNA干扰组肝癌细胞中(MHCC97-H-shRNA-Tspan8)未见发生;免疫共沉淀显示Tspan8可与α6结合形成复合物,提示Tspan8偶联α6后形成复合物并可促进肝癌侵袭转移.结论 四跨膜蛋白Tspan8表达与肝癌侵袭转移正相关,并可能与整合素α6结合而诱导肝癌细胞发生上皮间质转化有关,是肝癌复发转移及预后干预的潜在靶点和分子靶向治疗指标.

关键词：肝细胞癌、四跨膜蛋白,Tspan8、上皮间质转变、转移

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资助基金：国家自然科学基金81160310、81260367;海南省自然科学基金81255、814318National Natural Science Foundation of China81160310,81260367;Natural Science Foundation of Hainan Province81255,814318

在线出版日期：2016-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：775-780