miR-139-5p靶向转化生长因子-β1抑制肝癌细胞侵袭转移的机制

摘要：

目的 研究miR-139-5p靶向转化生长因子(TGF)-β1调控上皮间质转化(EMT)相关信号通路抑制肝癌细胞侵袭转移的分子机制.方法 首先通过生物信息学方法,发现miR-139-5p是TGF-β1的最佳靶miRNA.在56例肝癌组织和20例癌旁组织中,通过免疫组化和蛋白印迹检测TGF-β1的表达水平;通过实时荧光定量(qRT)-PCR检测miR-139-5p表达,分析两者之间的相关性.在高转移和低转移的肝癌细胞株中,qRT-PCR检测miR-139-5p表达,蛋白印迹检测TGF-β1、N-cad-herin、Vimentin表达,分析miR-139-5p与上述三个蛋白之间的关系.在重组细胞株中,用qRT-PCR检测miR-139-5p的表达,蛋白印迹检测TGF-β1的表达,分析miR-139-5p表达是否与TGF-β1相关;Transwell方法检测miR-139-5p表达改变对肝癌重组细胞系侵袭能力的影响.结果 生物信息学发现有20个miRNAs可与TGF-β1结合.其中miR-139-5p是与TGF-β1结合最稳定,且特异性最好的首选靶miRNA.肝癌组织中TGF-β1表达阳性率为80.4％ (45/56),癌旁正常肝组织中表达阳性率为15.0％ (3/20),两者差异有显著性统计学意义(P＜0.05).肝癌组织中miR-139-5p与TGF-β1的表达呈负相关.TGF-β1、N-cadherin、Vimentin三个蛋白的表达水平在不同转移细胞系中差异显著(P＜0.05).转染miR-139-5p可下调肝癌细胞TGF-β1的表达,miR-139-5p可与TGF-β1的UTR位点结合.miR-139-5p高表达细胞株侵袭细胞计数为(53±4)个/高倍视野,明显低于其他三组(P＜0.05).结论 miRNA-139-5p可通过靶向结合TGF-β1,调控EMT信号通路,抑制肝癌细胞的侵袭转移.

关键词：miRNA、肝癌、侵袭转移、转化生长因子-β1、上皮间质转化信号通路

所属期刊栏目：22

分类号：R735.7;S826.3;R392.12

在线出版日期：2016-03-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：17-23