甲胎蛋白腺病毒载体诱导的树突状细胞对人肝癌细胞HepG2的免疫治疗作用

摘要：

目的 研究重组甲胎蛋白(AFP)特异性T细胞的体外抗肝细胞癌免疫活性及其机制.方法 实验分为:空白对照HepG2组;CD8+T+AFP空载组;CD8+T+AFP过表达组;CD8+T+AFP空载+ JAK2抑制剂组;CD8+T+AFP过表达+JAK2抑制剂组.分离、鉴定DC细胞,构建AFP腺病毒并转染树突状细胞(dendritic cells,DC),活化AFP特异性的CD8+T细胞,检测CD8+T细胞对人肝癌细胞HepG2的影响.采用CCK8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况;ELISA法检测IL-2、IL-6、IL-6、IL-10、IFN-γ(人干扰素γ)、TNF-α、PFP(穿孔素)、granzyme B(颗粒酶)表达情况;蛋白印迹检测p-STAT3/STAT3、p-JAK2/JAK2、Bax/Bcl-2、Fas/Fasl表达情况.结果 实验显示,AFP特异性CD8+T细胞体外能有效抑制HepG2细胞增殖,上调IL-2、IFN-γ、TNF-α、PFP、granzyme B、Bax/Bcl-2的表达水平,显著抑制T细胞活化的负调控因子IL-10及p-STAT3/STAT3、p-JAK2/JAK2表达.结论 活化的AFP特异性T细胞能显著抑制肝细胞癌增殖.其抗肿瘤机制可能是重组AFP腺病毒活化、促进T细胞增殖,通过升高Bax/bcl-2和促进穿孔素/颗粒酶通路并特异性杀伤HepG2.JAK2抑制剂在该机制中起到一定调控作用.

关键词：肝细胞癌、甲胎蛋白、树突状细胞、腺病毒、转染

所属期刊栏目：21

分类号：R730.51;R511.8;R3

资助基金：国家自然科学基金81372461

在线出版日期：2015-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：486-489