PNP-CD融合自杀基因系统对肝癌细胞杀伤作用的实验研究

摘要：

目的 分析PNP-CD融合自杀基因系统对肝癌细胞HepG2的杀伤作用并探讨其可能的机制.方法 利用重组PCR定点诱变法制备融合基因PNP-CD.将PNP-CD插入真核表达载体pcDNA3.0中,构建融合自杀基因表达载体pcDNA3.0/PNP-CD.经酶切、PCR及测序鉴定重组体,G418筛选获得稳定转染pcDNA3.0/PNP-CD的抗性细胞克隆.用RT-PCR和Western Blotting法检测PNP-CD基因在HepG2细胞中的表达.用台盼蓝排斥法检测细胞生长曲线,用MTT法检测细胞细胞克隆对相应前药敏感性及所导致的旁观者效应.结果 融合基因片段PNP-CD正确插入了pcDNA3.0中,pcDNA3.0/PNP-CD在HepG2细胞中实现了表达.细胞抗性克隆对特定的前药高度敏感.在两种前药联合作用下,pcDNA3.0/PNP-CD所致旁观者效应明显强于只给予MeP-dR一种前药所致旁观者效应.结论 具有双自杀基因功能的PNP-CD融合基因系统是肝癌基因治疗中一种高效治疗载体,对肝癌细胞有着良好的杀伤作用.

关键词：癌、肝细胞、PNP/MeP-dR系统、CD/5-FC系统、融合自杀基因、基因治疗

所属期刊栏目：16

分类号：R73(肿瘤学)

在线出版日期：2010-09-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：624-627