脱氧核酶抑制COX-2基因表达并促进人肝癌细胞的凋亡

摘要：

目的 探讨利用脱氧核酶切割环氧化酶-2(COX-2)mRNA来抑制其基因表达以及对人肝癌细胞凋亡的影响.方法 合成针对COX-2基因的"10～23"型脱氧核酶及其类似物,提取人肝癌细胞总RNA在胞外切割COX-2 mRNA,检测其胞外切割活性;转染肝癌细胞,检测其在细胞内的切割活性及对细胞凋亡的影响.用RT-PCR检测COX-2和凋亡相关基因bcl-2、bax的mRNA水平,用荧光免疫方法测定相应的蛋白水平.结果 非修饰脱氧核酶DzT和修饰的脱氧核酶DzTi(在DzT的3'末端添加倒位连接的T碱基)在胞外切割反应中能够有效地切割COX-2 mRNA;在转染进入肝癌细胞后,DzTi比DzT显示更强的切割活性,显著地下调细胞内COX-2蛋白水平(P＜0.01)和bcl-2蛋白水平(P＜0.05),上调bax蛋白的表达(P＜0.01),抑制肝癌细胞的生长(P＜0.05).脱氧寡核苷酸DzT'和DzTi'是由对DzT和DzTi的催化区进行碱基替换而成,在胞外和胞内均不能切割COX-2mRNA和促进肝癌细胞的凋亡.结论 脱氧核酶能够有效切割COX-2 mRNA,抑制COX-2蛋白表达和促进肝癌细胞凋亡,有可能作为COX-2抑制剂用于医学临床.

关键词：癌、肝细胞、脱氧核酶、环氧化酶-2

所属期刊栏目：13

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：广东省社会发展领域科技技术项目53024

在线出版日期：2007-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：617-620