坏死性胰腺炎大鼠肠粘膜细胞表皮生长因子及其受体表达的变化

摘要：

@@利用大鼠坏死性胰腺炎模型，测定小肠粘膜上皮细胞内表皮生长因子(EGF)含量、及其受体与mRNA表达。探讨这些变化与坏死性胰腺炎肠粘膜屏障损伤的关系。
1.材料与方法：(1)动物与分组：采用雄性Spragure-Dawly大鼠50只，体重340～380 g，随机分为5组：虚拟手术组(Ⅰ组)；其余4组分别为制模后3 h组(Ⅱ组)、6 h组(Ⅲ组)、12 h组(Ⅳ组)处死和自然死亡组(Ⅴ组)。(2)大鼠急性坏死性胰腺炎模型的制备：采用2.5%戊巴比妥钠，1 ml/kg腹腔内麻醉后，腹部正中切口打开腹腔，在胆总管进入十二指肠开口下缘处用金属夹夹住十二指肠，然后向胰管方向注入5%牛磺酸钠1 ml/kg，注射完毕后用丝线结扎胆总管，2 min后松开银夹及胆总管处的丝线，关腹。虚拟手术组，操作同试验组，注入等量生理盐水，术后自由饮水。(3)方法与步骤：切取1 mm×2 mm的空肠组织块，3%戊二醛固定，依次脱水、包埋、超薄切片及醋酸铀、枸橼酸铅双染色，在透射电镜下对小肠粘膜细胞超微结构进行观察。于屈韧带远侧取近段空肠2 cm，甲醛固定，常规脱水，石蜡包埋，5 μm连续切片，待作免疫组织化学及原位杂交染色。采用ABC法进行小肠粘膜细胞EGF及EGF受体的免疫组织化学染色，EGF受体mRNA采用地高辛随机引物原位杂交法。在单盲情况下应用四川大学研制的MIAS-300全自动图像分析仪，在每张免疫组织染色及原位杂交染色切片上任意选取20个阳性细胞进行吸光度扫描，计算平均吸光度值(A)，即单位面积内EGF含量、EGF受体或EGF受体mRNA的表达。结果以均数±标准差表示，应用第四军医大学统计教研室SPLM统计软件进行统计学处理。

机标关键词：坏死性胰腺炎、大鼠、小肠粘膜细胞、内表皮生长因子、受体表达、原位杂交染色、免疫组织化学染色、胰腺炎模型、胆总管、虚拟手术、小肠粘膜上皮细胞、十二指肠、粘膜屏障损伤、细胞超微结构、吸光度、统计学处理、切片、第四军医大学、原位杂交法、戊巴比妥钠

所属期刊栏目：7

分类号：R576(消化系及腹部疾病)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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