原位杂交和免疫组化研究人类胰腺癌的Ki-67基因表达

摘要：

目的应用地高辛标记的Ki-67 cRNA(against exon 13 of the gene)进行mRNA原位杂交和免疫组化分析胰腺癌中Ki-67基因的mRNA转录和蛋白翻译,研究Ki-67基因结构和功能表达的关系.方法 40例胰腺癌(20例高分化腺癌,20例低分化腺癌),9例非胰腺肿瘤(5例正常胰腺,4例慢性胰腺炎),Ki-67基因第13外显子cDNA片段(435 bp)由PCR扩增,然后PCR产物克隆到质粒(3.9kb PCRTMⅡ vector)进行扩增,以此模板合成地高辛标记的cDNA探针,应用mRNA原位杂交结合免疫组化研究Ki-67基因在胰腺癌的转录和蛋白翻译.结果应用地高辛标记的Ki-67 mRNA原位杂交和MIB-1免疫组化成功地检测胰腺癌巢中明显高于正常的Ki-67 mRNA转录和蛋白翻译,胰腺癌Ki-67表达明显高于非胰腺癌,并与胰腺癌组织学分级密切相关.结论本研究首次证明:人类胰腺癌存在Ki-67基因的过度转录和翻译;且此基因的表达强度与胰腺癌的组织学分级亦密切相关,此基因的exon 13的转录在最终Ki-67蛋白的过度表达中起极重要的作用.

关键词：胰腺癌、Mrna原位杂交、Ki-67基因、免疫组化

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：中国科学院资助项目39600141;浙江省自然科学基金396498

在线出版日期：2006-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：293-297