白细胞介素-37通过重组人PDZ区域含1蛋白影响痛风发病的作用机制研究

摘要：

目的 探讨痛风发病的分子病理机制,通过初步研究验证并揭示IL-37通过NF-KB通路影响痛风发病中重组人PDZ区域含1蛋白(PDZK1)的作用机制.方法 使用炎症信号IL-37刺激HK-2细胞,分别对IL-37(A组)、PDTC+IL-37(B组)、Wortmannin(PI3K通路抑制剂)+IL-37(C组)0、5、10、20、40 ng/ml浓度处理条件下通过实时荧光定量PCR技术(Real-time PCR)检测PDZK1 mRNA表达水平,检测PDZK1蛋白表达水平,用细胞免疫荧光检测PDZK1表达情况及其亚细胞定位.加入抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸铵(PDTC)(NF-κB通路抑制剂)或者Wortmannin再加入炎症信号刺激蛋白印迹法检测HK-2细胞PDZK1蛋白表达量的变化,组间均采用t检验进行统计学分析.结果 PDZK1 mRNA水平分别为[A组(28.71±0.35,28.57±0.31,28.78±0.28,28.63±0.29,28.62±0.19);B组(28.71±0.31,28.83±0.27,28.58±0.26,28.73±0.36,28.68±0.35);C组(28.81±0.32,28.91±0.29,28.72±0.24,28.59±0.18,28.58±0.22)],A组与B组(t=5.73,4.72,4.69,5.86,6.79),A组与C组(t=6.78,7.13,7.47,6.38,5.98)相比差异均无统计学意义(P>0.05).3组通过蛋白质印迹法分析PDZK1蛋白水平分别为[A组(0.200±0.082,0.412±0.032,0.723±0.063,1.202±0.021,1.222±0.023);B组(0.124±0.064,0.303±0.081,0.325±0.062,0.223±0.071,0.343±0.052);C组(0.017±0.022,0.204±0.015,0.187±0.053,0.302±0.051,0.404±0.051)],A组用不同浓度的IL-37处理后PDZK1蛋白水平随着IL-37浓度的增加而增加;B组的PDZK1蛋白水平随着IL-37浓度的增加而增加,但其蛋白的水平比仅用IL-37处理的组别要低,在IL-37浓度为40 ng/ml时出现了下降的趋势;C组PDZK1蛋白水平随着IL-37浓度的增加而增加,但其蛋白的水平比仅用IL-37处理的组别要低,A、B 2组差异无统计学意义(t值分别为1.83,1.37,1.64,1.57,1.49,P>0.05);A、C 2组差异无统计学意义(t值分别为1.28,1.37,1.26,1.42,1.39,P>0.05).免疫荧光结果分析:3组结果与蛋白质印迹法结果的趋势基本吻合.结论 IL-37通过PDZK1蛋白导致痛风发病作用机制可能不是发生在转录水平,很可能发生在蛋白质翻译水平..

关键词：白细胞介素类、痛风、重组人PDZ区域含1蛋白、核因子-κB通路、作用机制

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资助基金：国家自然科学基金面上项目81671595;中华风湿燎原计划基金LYJH-010National Natural Science Foundation of China General Program81671605;Rheum-atism Liaoyuan Program Foundation of ChinaLYJH-010

在线出版日期：2019-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：402-405