瘦素对骨髓间充质干细胞及免疫细胞亚群的调控作用及其对狼疮鼠病情的影响

摘要：

目的 探讨重组瘦素作用于MRL/lpr鼠等动物模型,对其骨髓MSCs衰老、免疫细胞亚群及狼疮病情的影响.方法 重组瘦素(1 μg/g,每日2次,3d)或PBS,腹腔注射C57BH6(B6)鼠、ob/ob鼠及MRL/lpr鼠(每组6只).考马斯亮蓝法进行尿蛋白定量检测;ELISA法测定血清瘦素水平、自身抗体(ANA、抗dsDNA抗体)、总IgG;直接贴壁法分离培养MSCs,β-半乳糖苷酶染色计数阳性细胞比例,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测p53、p21的mRNA和蛋白水平,联合评估MSCs衰老情况;流式细胞术检测调节性T细胞及辅助性T细胞(Th)17细胞亚群.采用t检验、方差分析进行统计分析.结果 狼疮鼠血清瘦素水平(4.5±0.8) ng/ml高于B6鼠(2.3±0.5) ng/ml(t=2.38,P＜0.05).瘦素体内作用均可促进小鼠骨髓MSCs衰老,表现为β-半乳糖苷酶阳性细胞比例增加[(20.6±0.6)％与(15.4±1.6)％,t=8.09,P＜0.05],p53、p21 mRNA和蛋白水平增高.瘦素作用于狼疮鼠致脾细胞数增多,且调节性T细胞降低[(2.77±0.23)％与(5.01±0.18)％,t=3.91,P＜0.01],Thl7细胞增加[(2.24±0.11)％与(1.74±0.07)％,t=5.013,P＜0.01].瘦素作用致狼疮鼠血清ANA水平进一步增高[(288±69) U/ml与(190±90) U/ml,t=2.84,P＜0.05].瘦素作用组血清抗dsDNA抗体水平均较PBS对照组升高[(12 399±1 237) U/ml与(6 217±1 304)U/ml,t=3.44,P＜0.01].瘦素也可升高狼疮鼠血清IgG浓度[(27.2±2.9) mg/ml与(25.0±3.3) mg/ml,t=3.07,P＜0.05].瘦素体内作用致狼疮鼠尿蛋白浓度较前增加[(1.00±0.10) mg/ml与(0.81±0.06) mg/ml,t=3.31,P＜0.05].结论 瘦素体内作用不仅加剧狼疮鼠骨髓MSCs的衰老,减弱其免疫调控功能,同时可直接作用引起Th17/调节性T细胞免疫失衡,从而加重狼疮病情.

关键词：瘦素、红斑狼疮、系统性、细胞衰老、间质干细胞、免疫调控

所属期刊栏目：22

资助基金：国家自然科学基金青年基金81501345;江苏省青年医学人才项目QNRC2016197National Natural Science Foundation of China81501345;Jiangsu Young Medical TalentsQNRC2016197

在线出版日期：2018-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：516-521