Dishevelled 2对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞血管内皮生长因子表达的影响

摘要：

目的 对RA成纤维样滑膜细胞(FLS)体外分离培养方法进行优化,观察Dishevelled 2 (Dvl 2)在RA-FLS中对血管内皮生长因子(VEGF)分泌的影响.方法 将行膝关节置换的RA患者滑膜剪碎,利用优化的组织块法进行RA-FLS体外分离培养.构建Dvl 2慢病毒过表达质粒,转染后利用Q-PCR及ELISA检测VEGF mRNA及蛋白表达情况.然后再将转染后RA-FLS予TNF-α重组蛋白10 ng/ml刺激24h,再次检测VEGF mRNA及蛋白表达情况.采用两独立样本t检验进行统计分析.结果 成功将RA-FLS分离并进行体外培养.当感染复数为30并配合使用适当浓度的polybrene促进转染即可满足实验要求,Dvl 2的mRNA较空病毒对照组升高79倍.与空病毒对照组相比,Dvl 2对RA-FLS分泌VEGF有轻度抑制作用;TNF-α刺激后,Dvl 2达表达组VEGF的mRNA[(2.15±0.10)倍,(2.92±0.47)倍,t=-3.924,P=0.003]及蛋白[(285±100) pg/ml,(155±61) pg/ml,t=-2.714,P=0.022]均低于空病毒对照组.结论 Dvl 2可抑制TNF-α对RA-FLS分泌VEGF的促进作用,具体机制有待进一步研究.

关键词：关节炎、类风湿、Wnt通路、滑膜细胞、血管内皮生长因子、Dishevelled2

所属期刊栏目：20

分类号：R285.5;R737.9;R363.121

在线出版日期：2016-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：659-662,后插1