细胞因子反应调节蛋白A对软骨细胞白细胞介素-1β转化酶表达的作用研究

摘要：

目的 探讨壳聚糖(CS)介导细胞因子反应调节蛋白A(CrmA)对软骨细胞IL-1β转化酶(ICE)和IL-1β mRNA和蛋白的表达作用.方法 体外培养兔关节软骨细胞,分别加入PBS、10 μg/mlCS/pcDNA3.1(+)和CS/pcDNA3.1 (+)CrmA处理后,加入10 ng/ml IL-1β共培养,采用实时定量PCR方法检测软骨细胞ICE和IL-1β mRNA的表达.蛋白印迹法分析软骨细胞ICE和IL-1β蛋白的表达.结果 ICEmRNA在CS/pcDNA3.1 (+)CrmA组(0.52±0.09)软骨细胞中的表达显著低于CS/pcDNA3.1(+)组(0.84±0.11,t=4.42,P＜0.01)和PBS组(1.00±0.10,t=6.58,P＜0.01),软骨细胞ICE蛋白在CS/pcDNA3.1(+)CrmA组(0.20+0.03)的表达明显低于CS/pcDNA3.1(+)组(0.37±0.05,t=4.85,P＜0.01)和PBS组(0.44±0.07,t=6.68,P＜0.01),CS/pcDNA3.1(+)组软骨细胞ICE mRNA和蛋白的表达与PBS组比较差异无统计学意义.与CS/pcDNA3.1(+)组(0.69±0.06,t=3.50,P＜0.01)和PBS(0.99±0.04,t=11.12,P＜0.01)组比较,CS/pcDNA3.1 (+)CrmA组软骨细胞IL-1β t=3.50,(0.55±0.08) mRNA表达明显降低.软骨细胞IL-1β蛋白的表达在CS/.pcDNA3.1 (+)CrmA组(0.230±0.020)显著低于CS/pcDNA3.1(+)组(0.450±0.060,t=5.07,P＜0.01)与PBS组(0.610±0.090,t=8.70,P＜0.01),CS/pcDNA3.1(+)组与PBS组比较软骨细胞IL-1β mRNA和蛋白的表达差异有统计学意义(t=7.61,P＜0.01;t=3.63,P＜0.01).结论 壳聚糖介导CrmA能够显著抑制ICEmRNA和蛋白的表达,从而下调IL-1β mRNA和蛋白的表达,这可能成为CS/pcDNA3.1 (+)CrmA抑制OA软骨退变的作用机制之一.

关键词：软骨细胞、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1、细胞因子反应调节蛋白A

所属期刊栏目：20

资助基金：国家自然科学基金81071494;中央高校基本科研业务费专项资金项目2042015kf10-14;湖北省科技支撑计划项目2015BCA316;湖北省卫生计生科研项目WJ2015MB024National Natural Science Foundation of China81071494;Central University Basic Scientific Research Business Expenses Special Funds Project2042015kf1014;Hubei Provincial Science and Technology Support Program2015BCA316;Health and Family Planning Research Project of Hubei ProvinceWJ2015MB024

在线出版日期：2016-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：609-613