R脊椎蛋白1协同Wnt3A通过Wnt/β-联蛋白信号通路促进成骨细胞分化

摘要：

目的 探究R脊椎蛋白1 (RSPO1)在成骨分化中的作用及机制.方法 利用xCELLigence系统研究RSPO1对C2C12细胞增殖及细胞活力的影响.通过磷酸酶检测试剂盒检测ALP活性,ELISA法检测护骨因子的表达,通过双荧光素酶报告基因检测系统,利用TOPflash T细胞因子(TCF)报告质粒检测Wnt/β-联蛋白(β-catenin)信号通路活性.利用蛋白印迹法检测β-catenin蛋白累积情况.采用t检验进行统计学分析.结果 RSPO1对C2C12细胞增殖及细胞活力无影响.RSPO1单独处理上调ALP活力(2.85±0.08和1.74±0.21,t=3.014,P＜0.05)及护骨因子表达能力(1.29±0.13和1.0±0.21,t=3.348,P＜0.05)较弱,而RSPO1及Wnt3A协同处理可显著增强ALP活力(81.37±5.08和1.74±0.21,=31.31,P＜0.01)并上调护骨因子表达(5.26±0.60和1.00±0.21,t=6.99,P＜0.01).RSPO1协同Wnt3A激活TCF活性并诱导β-catenin蛋白积累(3.28±0.18和1.00±0.21,t=10.94,P＜0.05).但是,单独RSPO1对TCF的活性及β-catenin积累无影响(1.25±0.08和1.0±0.21,t=2.225,P＞0.05).结论 RSPO1可协同Wnt3A激活Wnt/β-catenin信号通路,诱导细胞成骨分化,提示RSPO1有望应用于RA的治疗.

关键词：关节炎、类风湿、Wnt3A蛋白质、成骨细胞、Wnt信号通路、R脊椎蛋白1

所属期刊栏目：20

分类号：R730.3;R329.2;R681

在线出版日期：2016-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：400-404,后插1