细胞自噬与风湿免疫病

摘要：

细胞自噬（autophagy）是细胞在自噬相关基因（autophagy related gene，atg）的调控下利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程，是以胞质内自噬体的出现为标志的细胞自我消化过程。广义上的自噬包括巨自噬（macroau- tophagy）、小自噬（microautophagy）和分子伴侣介导的自噬（chaperone-mediated autophagy， CMA）3种类型。在哺乳动物中研究最多的是巨自噬，即通常说的自噬[1]。细胞自噬首次于20世纪50年代被比利时科学家Christian de Duve在电镜察下观察到，Christian de Duve也因此被尊为细胞自噬研究的鼻祖。电镜下观察自噬小体虽然被认为是自噬检测的金标准，但由于其自身的局限性而其应用受到限制。微管相关蛋白轻链3（microtubule-associated protein light chain 3，LC3）是哺乳动物体内的酵母同源蛋白Atg8，在细胞内有两种存在形式：LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ。 LC3蛋白在合成后其C端即被Atg4蛋白酶切割变成LC3-Ⅰ而散在分布于细胞质内。LC3-Ⅰ和磷脂酰乙醇胺（phosphatidylethanolamine， PE）偶联形成 LC3-Ⅱ定位于自噬体内膜和外膜，且始终稳定地保留在自噬体膜上直到与溶酶体融合，因而被作为检测自噬的标记物。虽然LC3-Ⅱ相对分子质量大于LC3-Ⅰ，但因其疏水极性，在十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）中的迁移速率大于LC3-Ⅰ，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的水平能反映自噬体的数量。绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）转染LC3，并通过荧光显微镜观察，定量分析GFP-LC3-Ⅱ荧光斑点，或经流式细胞术定量分析荧光强度，也能够反映自噬体的数量。另外， p62/SQSTM1介导LC3-Ⅱ与自噬体膜的连接，在自噬的中、晚期被降解，细胞内p62/SQSTM1的表达水平与自噬体数量呈负相关，也被作为自噬检测的常用指标。但需要指出的是，细胞自噬是一动态过程，自噬体的数量并不能代表细胞自噬水平，只有基于自噬流的检测才是反映自噬活性的可靠指标。

机标关键词：细胞自噬、自噬体、微管相关蛋白、聚丙烯酰胺凝胶电泳、绿色荧光蛋白、检测、定量分析、哺乳动物、十二烷基硫酸钠、相对分子质量、细胞内、溶酶体、磷脂酰乙醇胺、related gene、显微镜观察、流式细胞术、自噬活性、荧光强度、消化过程、相关基因

所属期刊栏目：20

分类号：S43;R73

资助基金：国家科技重大专项2012ZX09303006

在线出版日期：2016-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：197-200