体外实验经典活化型巨噬细胞抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖

摘要：

目的 研究经典活化型巨噬细胞(M1)对RA滑膜成纤维细胞(FLS)和对照组OA-FLS增殖的影响,为进一步研究巨噬细胞在RA疾病进展中的作用奠定基础.方法 采用脂多糖和IFN-γ体外诱导人单核细胞(THP-1)为M1,流式细胞术(FCM)检测M1表面特异性标志分子HLA-DR和CD197表达.transwell非接触式共培养M1和RA-FLS、OA-FLS,结晶紫染色法观察共培养48 h后RA-FLS、OA-FLS的增殖情况.MTS法检测M1分泌细胞因子对RA-FLS、OA-FLS增殖的影响.ELISA检测单独培养体系及共培养体系细胞培养上清中细胞因子TNF-α和IL-12的变化.采用配对t检验比较分析.结果 脂多糖和IFN-γ诱导THP-1为M1后,M1表面标记分子CD197和HLA-DR阳性率为78.25％和87.96％.RA-FLS、OA-FLS与M1共培养48 h后,RA-FLS、OA-FLS增殖受到明显抑制,共培养组显微镜下每视野RA-FLS、OA-FLS细胞数分别为(64±30)、(85 ±23),RA-FLS、OA-FLS单独培养组分别为(467±87)、(263±78),差异有统计学意义(t=7.459,3.791;P均＜0.05).M1与FLS共培养对RA-FLS、OA-FLS的增殖有明显抑制作用,差异有统计学意义(t=-7.155,-8.111;P均＜0.05).RA-FLS单独培养组和M1与RA-FLS共培养组培养上清中TNF-α的浓度分别是(0.024±0.011) ng/ml、(0.832±0.241) ng/ml,IL-12浓度分别为(0.033±0.015) ng/ml、(0.372±0.122) ng/ml;OA-FLS单独培养组和M1与OA-FLS共培养组培养上清中TNF-α的浓度分别是(0.031 ±0.017) ng/ml、(0.854±0.323) ng/ml,IL-12浓度分别为(0.012±0.009) ng/ml、(0.373±0.144) ng/ml;共培养组TNF-α和IL-12浓度均明显升高,差异均有统计学意义(t=-4.997,-4.777,-4.407,-4.334;P均＜0.05),RA组与OA组的结果一致.结论 M1与RA-FLS、OA-FLS共培养后,显著抑制RA-FLS、OA-FLS增殖,可能与共培养上清中TNF-α和IL-12的增加有关.

关键词：关节炎、类风湿、滑膜成纤维细胞、巨噬细胞、增殖

所属期刊栏目：19

分类号：R329.24;R593.22;R686.7

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;上海市科委生物医药领域重点项目;上海市浦东新区卫生计生委科技项目

在线出版日期：2015-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：540-544,后插1