小白菊内酯对核因子κB受体活化因子配体诱导的RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响

摘要：

目的：研究小白菊内酯对NF-κB受体活化因子配体（RANKL）诱导的RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响。方法以 RANKL 单独诱导小鼠单核巨噬细胞 RAW264.7细胞为对照组，分别采用不同浓度（0.5、1、2μmol/L）小白菊内酯联合RANKL诱导RAW264.7细胞分化培养。第3、5、7天采用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色法检测破骨细胞样细胞并计数； ELISA法检测第7天各组培养液上清中抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRAP5b）含量；实时（RT）-PCR检测第7天各组破骨细胞标志基因降钙素受体（CTR）和MMP-9的表达。使用SPSS 17.0统计学软件进行方差分析和t检验以比较组间差异。结果不同的培养条件下RANKL均能诱导RAW264.7细胞分化为成熟的破骨细胞。与同期对照组比较，诱导第3、5、7天，小白菊内酯各组破骨细胞数均明显减少；随小白菊内酯浓度的增大而破骨细胞数减少幅度更显著，0.5、1、2μmol/L各组第7天破骨细胞数较对照组分别下降为36.3%、40.8%、49.3%，细胞数差异有统计学意义（t=7.758，8.742，10.56；P<0.05）。各组第7天培养液中TRAP5b含量变化与细胞计数结果相符（P<0.05）。 TRAP阳性破骨细胞的CTR、MMP-9表达量随着小白菊内酯浓度增加而减少，2μmol/L小白菊内酯组最低，与对照组比较小白菊内酯0.5、1、2μmol/L各组差异均有统计学意义（P<0.05）。结论小白菊内酯对RANKL诱导下RAW264.7细胞向破骨细胞的分化具有抑制作用，且抑制作用具有剂量依赖性。

关键词：破骨细胞、小白菊内酯、核因子KB受体活化因子配体、抗酒石酸酸性磷酸酶染色

分类号：R59;R39

在线出版日期：2015-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：468-472