缺氧条件下沉默Rab11基因的表达对子宫颈癌细胞系SiHa细胞侵袭和迁移能力的影响

摘要：

目的：通过观察缺氧条件下沉默Rab11基因对子宫颈癌细胞系SiHa细胞侵袭和迁移能力的影响，并探讨其可能的作用机制。方法实验分为4组：缺氧Rab11干扰组（缺氧状态下转染siRNA）、缺氧阴性干扰组（缺氧条件下转染空白无干扰意义的siRNA）、缺氧空白组（缺氧条件下培养）、常氧空白组（常氧条件下培养）。蛋白印迹法检测4组SiHa细胞中Ras相关蛋白11（Rab11）、整合素α5、整合素β3、磷酸化局部黏着斑激酶（p-FAK）、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶（p-PI3K）及Ras相关的C3肉毒素底物1（Rac1）的表达水平；实时荧光定量PCR技术检测4组SiHa细胞中Rab11 mRNA的表达水平；体外侵袭实验检测4组SiHa细胞的侵袭能力；体外迁移实验检测4组SiHa细胞的迁移能力；免疫荧光法检测4组SiHa细胞中Rac1蛋白的表达。结果（1）蛋白印迹法检测显示：①缺氧Rab11干扰组中SiHa细胞Rab11、整合素α5、整合素β3、p-FAK、p-PI3K、Rac1蛋白的表达水平分别为0.44±0.03、0.30±0.03、0.29±0.03、0.30±0.03、0.30±0.03、0.34±0.04；②缺氧阴性干扰组分别为0.72±0.03、0.73±0.03、0.59±0.03、0.61±0.03、0.59±0.03、0.72±0.03；③缺氧空白组分别为0.73±0.03、0.74±0.03、0.61±0.03、0.62±0.03、0.60±0.03、0.73±0.03；④常氧空白组分别为0.56±0.04、0.33±0.03、0.33±0.03、0.36±0.03、0.35±0.03、0.47±0.03。（2）4组SiHa细胞中Rab11 mRNA的表达水平，缺氧Rab11干扰组为0.570±0.046，缺氧阴性干扰组为1.442±0.101，缺氧空白组为1.454±0.114，常氧空白组为1.000±0.000。（3）4组SiHa细胞侵袭至小室下层的细胞数分别为，缺氧Rab11干扰组（50±11）个，缺氧阴性干扰组（104±17）个，缺氧空白组（106±16）个，常氧空白组（65±12）个。（4）4组SiHa细胞迁移的数量分别为，常氧空白组（127±12）个，缺氧空白组（169±15）个，缺氧阴性干扰组（161±13）个，缺氧Rab11干扰组（77±13）个。（5）免疫荧光法显示4组SiHa细胞核中周围分布有红色荧光，为Rac1蛋白的定位表达。以上检测指标的比较结果均为：缺氧Rab11干扰组<常氧空白组<缺氧阴性干扰组<缺氧空白组；缺氧Rab11干扰组的结果较缺氧空白组、缺氧阴性干扰组均明显降低（P<0.05）；而缺氧空白组的结果与缺氧阴性干扰组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；缺氧空白组的结果较常氧空白组明显升高（P<0.05）。结论缺氧促进子宫颈癌细胞系SiHa细胞的侵袭、迁移；缺氧时，Rab11蛋白下调能够抑制SiHa细胞的侵袭、迁移，其机制可能与整合素α5、整合素β3、p-FAK、p-PI3K及Rac1蛋白表达水平下降有关。

关键词：宫颈肿瘤、细胞系、肿瘤、rab GTP结合蛋白质类、rac1 GTP结合蛋白质、肿瘤侵润、细胞运动、缺氧

所属期刊栏目：51

分类号：R73;X7

在线出版日期：2017-02-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：928-933