Linc-ROR在高级别卵巢浆液性癌组织和细胞中的表达及其功能研究

摘要：

目的：探讨基因间长链非编码RNA-重编码调控因子（Linc-ROR）在高级别卵巢浆液性癌组织和细胞中的表达，及其对高级别卵巢浆液性癌细胞生物学功能的影响。方法（1）收集2014年6月—2016年2月在青岛大学附属医院行手术治疗的34例高级别卵巢浆液性癌患者的癌组织标本，以同期19例因子宫肌瘤行子宫全切除+双侧附件切除术患者的正常输卵管伞端组织作为对照，采用逆转录（RT）-PCR技术检测其Linc-ROR mRNA的表达，并分析Linc-ROR mRNA表达与高级别卵巢浆液性癌手术病理分期、淋巴结转移的关系。（2）采用小分子干扰RNA（siRNA）靶向干扰卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞系SKOV3细胞中Linc-ROR mRNA的表达，实验分为4组，Linc-ROR-i组（转染Linc-ROR siRNA）、Linc-ROR-NC-i组（转染Linc-ROR siRNA的阴性对照siRNA）、Linc-ROR-p组（转染过度表达 Linc-ROR基因的重组载体pIRES2-EGFP-Linc-ROR质粒）、Linc-ROR-NC-p组（转染pIRES2-EGFP-Linc-ROR质粒的阴性对照质粒），采用RT-PCR技术检测4组SKOV3细胞中Linc-ROR mRNA的表达，活细胞计数（CCK-8）法、体外划痕实验和体外侵袭实验分别检测转染后4组SKOV3细胞的增殖情况以及细胞迁移、侵袭能力。结果（1）RT-PCR技术检测显示，高级别卵巢浆液性癌组织中Linc-ROR mRNA表达水平为4.31±0.38，明显高于正常输卵管组织中的1.03±0.21（t=25.842，P<0.01）；Linc-ROR mRNA的表达水平随着高级别卵巢浆液性癌手术病理分期的增高明显升高（F=95.702，P<0.01），且有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者（t=7.397，P<0.01）。（2）RT-PCR技术检测显示，Linc-ROR-i组细胞中Linc-ROR mRNA的表达水平明显低于其阴性对照Linc-ROR-NC-i组（分别为0.30±0.11、1.02±0.10；t=15.269，P<0.01）；Linc-ROR-p组细胞中Linc-ROR mRNA的表达水平明显高于其阴性对照Linc-ROR-NC-p组（分别为8.90±0.45、1.03±0.17；t=21.934，P<0.01）。CCK-8法检测显示，细胞培养3 d后（包括培养3、4、5、6 d），Linc-ROR-i组细胞各时间点的增殖能力[以吸光度（A）值表示]均明显低于其阴性对照Linc-ROR-NC-i组，Linc-ROR-p组细胞各时间点的A值均明显高于其阴性对照Linc-ROR-NC-p组，分别比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。体外划痕实验检测显示，培养48 h后，Linc-ROR-i组细胞的迁移率明显低于其阴性对照Linc-ROR-NC-i组[分别为（52±4）%、（67±5）%；t=5.720，P<0.01]；Linc-ROR-p组细胞的迁移率明显高于其阴性对照Linc-ROR-NC-p组[分别为（84±4）%、（66±4）%；t=7.330，P<0.01]。体外侵袭实验检测显示，培养48 h后，Linc-ROR-i组的侵袭细胞数为（74±3）个，明显低于其阴性对照Linc-ROR-NC-i组的（104±3）个（t=15.810，P<0.01）；Linc-ROR-p组的侵袭细胞数为（217±4）个，明显高于其阴性对照Linc-ROR-NC-p组的（108±5）个（t=38.060，P<0.01）。结论高表达Linc-ROR能够增强高级别卵巢浆液性癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力， Linc-ROR可能是导致高级别卵巢浆液性癌发生、发展和侵袭、转移的重要分子之一。

关键词：卵巢肿瘤、RNA、长链非编码、细胞系、肿瘤、细胞增殖、肿瘤侵润

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分类号：R73;R3

资助基金：青岛市公共领域科技支撑计划[2012-1-3-2-9-nsh]@@@@Science and Technology Support Program of Public Domain of Qingdao 2012-1-3-2-9-nsh

在线出版日期：2017-02-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：921-927