10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2016.10.006
阴道上皮细胞IgG的分泌及其抗白假丝酵母菌作用的初步研究
目的:初步探讨阴道上皮细胞IgG的分泌及其抗白假丝酵母菌的作用。方法(1)采用免疫组化EnVision二步法检测正常阴道上皮细胞系VK2/E6E7细胞中IgG的表达情况。(2)以下实验分为3组,VK2/E6E7细胞中加入不同比例的白假丝酵母菌,白假丝酵母菌∶细胞的比例分别为1∶10、1∶1,即为酵母菌+细胞(1∶10)组和酵母菌+细胞(1∶1)组;以不加入白假丝酵母菌,单纯培养的VK2/E6E7细胞为空白对照组。倒置显微镜下观察3组VK2/E6E7细胞培养24 h后的生长状况;ELISA法检测3组VK2/E6E7细胞分别培养0、3、6、12、24、48 h后上清液中IgG的含量。结果(1)免疫组化EnVision二步法检测显示,VK2/E6E7细胞呈多角形,细胞核呈淡蓝色,IgG表达于细胞质,呈强阳性表达,为弥漫的棕褐色染色颗粒;阴性对照细胞仅见淡蓝色细胞核,未见棕色染色颗粒。(2)倒置显微镜下观察,3组VK2/E6E7细胞培养24 h后,空白对照组细胞轮廓清晰,折光性强,细胞核较大,为圆形或椭圆形,呈铺路石样外观。酵母菌+细胞(1∶10)组白假丝酵母菌开始发芽、呈球拍状,部分向菌丝相转化,生长密度较低;细胞与白假丝酵母菌相互靠近,细胞的折光性降低,细胞质内出现空泡和黑色小颗粒,细胞形态较完整。酵母菌+细胞(1∶1)组可见白假丝酵母菌对细胞具有明显的侵袭作用,假菌丝密集交错、生长旺盛,细胞数量减少,细胞核散大,细胞膜形态不完整,细胞崩解,细胞间连接松散,部分区域细胞脱落、凋亡。ELISA法检测显示,分别培养0、3、6、12、24、48 h,3组细胞上清液中IgG的含量在各时间点分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01);酵母菌+细胞(1∶10)组细胞上清液中IgG的含量在3、6、12、24 h时分别与酵母菌+细胞(1∶1)组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。当白假丝酵母菌与VK2/E6E7细胞的比例为1∶1且共同培养24 h时,IgG的含量最高,为(1.61±0.05)μg/ml。结论白假丝酵母菌对阴道上皮细胞具有明显的侵袭作用,并随着白假丝酵母菌浓度的增加,对细胞的侵袭作用增强。阴道上皮细胞与白假丝酵母菌共同培养后可减少上皮源性IgG的分泌。
阴道、上皮细胞、念珠菌、白色、免疫球蛋白G、免疫、先天
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R75;DF7
2016-11-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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