PPARγ基因表达对子宫内膜癌细胞迁移、侵袭及增殖能力的影响

摘要：

目的 探讨过氧化物酶增殖体激活受体γ(PPARγ)基因表达对子宫内膜癌细胞迁移、侵袭及增殖能力的影响.方法 选取子宫内膜癌细胞系ECC-1(ER阳性)及KLE(ER阴性)细胞,分别转染PPARγ基因表达载体(PPARγ载体组)及PPARγ小分子干扰RNA(siRNA)质粒(PPARγsiRNA组),以转染无义序列siRNA(siRNA无义序列组)、空载体(空载体组)者为阴性对照,以只加入脂质体者(空白对照组)为空白对照.转染48 h后,实时逆转录(RT)-PCR技术及蛋白印迹法(western blot)检测细胞中PPARγmRNA及蛋白表达水平的变化;western blot检测细胞中Wnt信号传导通路中关键蛋白——β连接素(β-catenin)及髓细胞增生原癌基因编码蛋白(C-myc)蛋白表达水平的变化;体外迁移、侵袭实验检测细胞迁移、侵袭能力的变化,活细胞计数(CCK-8)法检测细胞增殖能力”以吸光度(A)值表示”.结果 转染48 h后,实时RT-PCR技术和western blot检测显示,PPARγ载体组ECC-1及KLE细胞中PPARγ mRNA(分别为5.18 ±0.99、4.54±0.89)和蛋白(分别为1.45±0.12、1.30±0.13)的表达水平升高,β-eatenin(分别为0.44 ±0.06、0.46±0.04)、C-myc(分别为0.42±0.08、0.30±0.11)蛋白表达水平降低,PPAR γ siRNA组ECC-1及KLE细胞中PPAR γ mRNA(分别为0.48 ±0.08、0.53±0.11)和蛋白(分别为0.41±0.04、0.49±0.05)的表达水平降低,β-catenin(分别为1.18±0.12、0.89±0.07)、C-myc(分别为0.91 ±0.08、0.77 ±0.12)蛋白的表达水平升高,分别与siRNA无义序列组、空载体组、空白对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).体外迁移、侵袭实验检测显示,PPAR γ载体组ECC-1、KLE细胞的迁移细胞数”分别为(129±9)、(119±9)个”及侵袭细胞数”分别为(63±12)、(68±16)个”减少,PPARγ siRNA组ECC-1、KLE细胞的迁移细胞数”分别为(201±14)、(170±11)个”及侵袭细胞数”分别为(142±9)、(138±7)个”增多,分别与siRNA无义序列组、空载体组、空白对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).CCK-8法检测显示,PPARγ载体组ECC-1、KLE细胞的A值(分别为0.66±0.14、0.78 ±0.06)均低于siRNA无义序列组、空载体组、空白对照组,PPARγ siRNA组ECC-1、KLE细胞的A值(分别为1.42±0.16、1.23±0.04)均高于siRNA无义序列组、空载体组、空白对照组,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 上调PPARγ基因表达可抑制子宫内膜癌细胞的迁移、侵袭及增殖,而下调PPARγ基因表达可促进子宫内膜癌细胞的迁移、侵袭及增殖.

关键词：子宫内膜肿瘤、PPARγ、细胞运动、肿瘤侵润、细胞增殖

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资助基金：山东省自然科学基金ZR2010HM102

在线出版日期：2014-06-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：360-365