雌激素剥夺状态下表皮生长因子信号系统在内异症发病中的作用

摘要：

目的 探讨在雌激素剥夺状态下表皮生长因子(EGF)、表皮生长因子受体(EGFR)、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)在内异症发病中的作用.方法 采用细胞培养基快速雌激素剥夺法和对内异症模型裸鼠切除双侧卵巢(去势)的方法,建立体外和体内两种雌激素剥夺的实验研究模型.(1)体外实验:对体外培养的雌激素剥夺状态下的异位子宫内膜细胞按以下不同的处理方法分为4组:①EGF组:加入不同浓度(0.01、0.1、1、10、50、100 ng/ml)的EGF培养细胞72 h(以浓度为10 ng/ml的EGF培养72 h的结果代表EGF组的结果)；②EGF+ PD98059组:以5×10-2 mol/LPD98059”细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂”培养细胞24 h后,再以10 ng/ml EGF +5×10-2 mol/LPD98059培养细胞72 h；③EGF+ ICI182780组:以10-6 mol/L ICI182780(ER抑制剂)培养细胞24 h后,再以10 ng/ml EGF+ 10-6 mol/L ICI182780培养细胞72 h；④空白对照组:不进行任何处理.用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测处理后各组异位子宫内膜细胞的增殖活性”以吸光度(A)值表示”；蛋白印迹法检测EGF组、EGF+PD98059组异位子宫内膜细胞中p-ERK1/2的蛋白表达.(2)体内实验:利用随机数字表法将64只内异症模型裸鼠随机分成对照组和去势组,每组各32只,去势组在造模3周后切除双侧卵巢.于造模后的4,6,8,10周,采用蛋白印迹法检测两组裸鼠腹腔病灶中EGF、EGFR、p-ERK1/2的蛋白表达水平.结果 (1)细胞增殖活性:EGF组经不同浓度(0.01、0.1、1、10、50、100 ng/ml)的EGF作用72 h后,细胞增殖活性依次为0.310±0.010、0.340±0.020、0.670±0.010、0.980±0.030、1.360 ±0.020、1.670±0.020,随EGF浓度的增加,细胞增殖活性逐渐增加.EGF+PD98059组细胞增殖活性为0.680±0.030,与EGF组(以浓度为10 ng/ml的EGF培养72 h的结果代表EGF组的结果)比较,差异有统计学意义(P＜O.01)；EGF+ICI182780组为0.330±0.030,空白对照组为0.310±0.030,两组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)蛋白表达水平:①体外实验中,EGF组p-ERK1/2的蛋白表达水平为0.670±0.020,空白对照组为0.600±0.010,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；EGF+PD98059组为0.610±0.020,与空白对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).②体内实验中,在造模后4、6、8周,去势组和对照组裸鼠腹腔异位病灶中EGF蛋白表达水平分别为(0.530±0.015和0.610±0.015)、(0.400±0.029和0.620±0.018)、(0.560±0.026和0.630±0.021)；EGFR蛋白表达水平分别为(0.500±0.030和0.640±0.030)、(0.470±0.020和0.630±0.020)、(0.510±0.030和0.610±0.020)；p-ERK1/2蛋白表达水平分别为(0.500±0.020和0.580±0.020)、(0.490±0.020和0.580±0.020)、(0.570±0.020和0.590±0.020)；两组在各个时间点EGF、EGFR、p-ERK1/2蛋白表达水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05)；在造模后10周,去势组和对照组EGF的蛋白表达水平为(0.620±0.020和0.620±0.020),EGFR为(0.610±0.020和0.610±0.020),p-ERK1/2为(0.590±0.010和0.600±0.020),两组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 在雌激素剥夺状态下,EGF可以通过激活ERK信号通路,刺激异位子宫内膜细胞的增殖,但需依赖ER的存在；异位子宫内膜病灶中EGF、EGFR、pERK1/2蛋白表达水平的抑制随雌激素剥夺时间的延长而逐渐减弱.

关键词：子宫内膜异位症、阉割、雌激素类、表皮生长因子、受体,表皮生长因子、细胞外信号调节MAP激酶类

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在线出版日期：2013-08-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：447-452