微小RNA-21表达在卵巢癌细胞生长和凋亡过程中的作用

摘要：

目的；探讨微小RNA-21( miR-21)在卵巢癌细胞生长、凋亡中的作用及调节机制。方法构建表达miR-21的重组干扰载体pSIREN-miR-21质粒，采用酶切鉴定和测序法证实。实验分为3组，即转染组：卵巢癌细胞株OVCAR3细胞转染重组干扰载体pSIREN-miR-21质粒；阴性对照组：OVCAR3细胞转染阴性对照pSIREN-miR-21-Neg质粒；空白对照组：OVCAR3细胞不转染质粒。采用茎环实时荧光定量逆转录(RT)-PCR技术检测3组细胞中miR-21的表达，蛋白印迹法检测3组细胞中程序性细胞死亡因子4( PDCD4)蛋白的表达，四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪检测3组细胞的增殖及凋亡情况。结果成功构建了表达miR-21的重组干扰载体pSIREN-niR-21质粒，并经酶切鉴定和测序法证实。转染组、阴性对照组和空白对照组OVCAR3细胞中niR-21的表达水平分别为0.26±0.08、1.26±0.21和1.00，转染组明显低于阴性对照组和空白对照组，差异有统计学意义(P＜0.01)。转染组、阴性对照组和空白对照组OVCAR3细胞中PDCD4蛋白的灰度值分别为1443 ±33、858±19和846±16，转染组明显高于阴性对照组和空白对照组，差异有统计学意义(P＜0.01)。转染组、阴性对照组和空白对照组OVCAP3细胞增殖的A值分别为0.661±0.015、0.848±0.150、0.935±0.133，转染组明显低于阴性对照组和空白对照组，差异有统计学意义(P＜0.01)。转染48 h后，转染组细胞的早期凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组[分别为(25.821±0.763)％、(0.010 ±0.003)％、(0.238±0.023)％；P ＜0.01]；转染72 h后，转染组细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率均明显高于阴性对照组和空白对照组[早期凋亡率分别为( 30.480±0.821)％、(7.792±0.312)％、(7.033±0.257)％，P＜0.01；晚期凋亡率分别为(3.558±0.211)％、(1.557±0.067)％、(1.049±0.028)％，P＜0.05]。结论miR-21参与调节卵巢癌细胞的生长和凋亡过程，可能通过调控PDCD4蛋白的表达而发挥作用。

关键词：卵巢肿瘤、微RNAs、RNA结合蛋白质类、凋亡调节蛋白质类、细胞系、肿瘤、细胞凋亡

所属期刊栏目：46

分类号：R246.3(中医临床学)

在线出版日期：2011-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：684-689