电转法介导沉默ABCE1基因对人胆囊癌细胞基因表达及增殖能力的抑制作用

摘要：

目的:研究电转法沉默ATP结合盒转运子E1(ABCE1)基因表达后对人胆囊癌GBC-SD细胞基因表达及增殖能力的抑制作用.方法:构建靶向ABCE1基因的载siRNA质粒(ABCE1-siRNA)以及阴性对照质粒(NC-siRNA),分别设置ABCE1-siRNA组、NC-siRNA组及空载组,于体外电转法转染至人胆囊癌GBC-SD细胞,形成ABCE1-GBC-SD、NC-siRNA-GBC-SD、Ctrl-GBC-SD细胞.分别采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)、蛋白印迹(Western blotting)检测电转后细胞中ABCE1基因mRNA与蛋白的表达水平,流式细胞仪检测GBC-SD细胞周期及凋亡,CCK-8法测定GBC-SD细胞的增殖能力.结果:成功构建靶向ABCE1基因的载siRNA质粒.与对照组相比,电转后ABCE1-GBC-SD细胞中ABCE1基因mRNA(0.45±0.06)和蛋白表达水平(0.65±0.10)显著降低(P<0.05);ABCE1-GBC-SD组细胞的生长速度减慢(P<0.05),细胞周期被阻滞于G0/G1期,S期的细胞数减少;与空载组相比,ABCE1-GBC-SD组细胞凋亡率(16.80±3.58)显著升高(P<0.01).结论:体外电转沉默ABCE1基因的表达后能够抑制胆囊癌细胞的基因表达及增殖能力.

关键词：胆囊癌、ATP结合盒转运子E1、电转法、细胞增殖

所属期刊栏目：23

分类号：R735.8(肿瘤学)

在线出版日期：2017-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：523-527