miR-21靶向PTEN调节PI3 K/AKT通路对狼疮性肾炎患者肾小球系膜细胞增殖及炎性因子分泌的影响

摘要：

目的:探讨miR-21靶向磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)调节磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路对人肾小球系膜细胞(human mesangial cells,HMCs)增殖及炎性因子分泌的影响.方法:选取在我院经肾穿刺活检诊断为LN的30例患者的肾组织标本,qRT-PCR和western blot检测狼疮性肾炎肾组织中miR-21和PTEN的表达水平;HMCs随机分为5组:NC mimics组、miR-21 mimics组、pcDNA3.1-NC组、pcDNA3.1-PTEN组和miR-21 mimics+pcDNA3.1-PTEN组;TargetScan预测miR-21与PTEN的结合位点;双荧光素酶报告基因验证miR-21与PTEN的靶向关系;细胞克隆形成实验检测miR-21靶向PTEN对HMCs增殖能力的影响;细胞流式术检测miR-21靶向PTEN对HMCs凋亡率的影响;ELISA检测miR-21靶向PTEN对HMCs炎性因子生成的影响;Western blot检测miR-21靶向PTEN调节PI3K/AKT通路相关蛋白的表达.结果:miR-21在狼疮性肾炎肾组织中高表达(P =0.043),PTEN在狼疮性肾炎肾组织中低表达(P=0.037);miR-21与PTEN存在靶向关系,且miR-21靶向下调PTEN的表达(P=0.003);与NC mimics组比较,iR-21 mimics组细胞集落数目增加(P=0.003),凋亡率下降(P =0.003),TNF-α、IL-1β3和IL-6的含量增加(均P=0.000),PTEN蛋白表达水平下调(P=0.003)、PBK和AKT蛋白表达水平上调(P =0.025,P=0.004);与pcDNA3.1-NC组比较,pcDNA3.1-PTEN组细胞集落数目减少(P=0.032),凋亡率上升(P =0.035),TNF-仅、IL-1β和IL-6的含量减少(P =0.003,P=0.037,P=0.029),PTEN蛋白表达水平上调(P =0.002)、PBK和AKT蛋白表达水平明显下调(均P=0.003);与miR-21 mimics组比较,miR-21 mimics+ pcDNA3.1-PTEN组细胞集落数目减少(P =0.003),凋亡率上升(P=0.000),TNF-α、IL-1β和IL-6的含量减少(P =0.003,P=0.004,P=0.004),PTEN蛋白表达水平上调(P=0.003)、PBK和AKT蛋白表达水平下调(P =0.031,P=0.039);与pcDNA3.1-PTEN组比较,miR-21 mimics+ pcDNA3.1-PTEN组细胞集落数目增加(P=0.029),凋亡率下降(P =0.031),TNF-α、IL-1β和IL-6的含量增加(P =0.000,P=0.003,P=0.003),PTEN蛋白表达水平下调(P =0.003),PI3K和AKT蛋白表达水平上调(P =0.002,P=0.003).结论:miR-21靶向PTEN对人肾小球系膜细胞的增殖、凋亡及炎性因子的分泌有一定影响,可能与PI3K/AKT通路有关.

关键词：miR-21;PTEN;PI3K/AKT通路;人肾小球系膜细胞;增殖;炎性因子

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资助基金：衢州市科技计划项目;浙江省自然科学基金资助项目

在线出版日期：2022-03-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：759-764,后插1