甘西鼠尾草总酚酸提取物对嘌呤霉素氨基核苷诱导损伤的足细胞中Toll样受体4表达的影响

摘要：

目的:探讨SPE及其单体对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)诱导的损伤足细胞中Toll样受体4(TLR4)通路表达的影响.方法:足细胞与含有甘西鼠尾草总酚酸提取物(SPE)、迷迭香酸(RA)、丹酚酸B(SalB)、RA+ SalB混合及他克莫司的完全培养液预先孵育30 min,再加入PAN(100 μg/ml)继续作用24h,观察足细胞骨架结构F-actin变化,western blot及半定量RT-PCR检测足细胞中TLR4、myd88、phosphor-NF-κB (pp65)在蛋白及mRNA水平的表达量变化.结果:(1)PAN作用24h后,足细胞骨架蛋白F-actin明显损伤,微丝解聚、胞体回缩,少数细胞尚存排列紊乱的丝状结构,而提前给予保护药物SPE、SalB、RA、SalB+ RA混合药物及他克莫司组的足细胞损伤明显减弱.(2)western blot数据显示,PAN诱导的损伤足细胞中TLR4、myd88及pp65蛋白的表达与正常组相比均有明显上调(P＜0.05);保护药物组:TLR4蛋白表达较模型组有明显下降(P＜0.05);MyD88蛋白表达除SalB高剂量组及SalB+ RA低剂量组较模型组无显著下降外,其余均能明显下调其表达量(P＜0.05);pp65在保护药物组中的表达均较模型对照组低(P＜0.05).(3)半定量RT-PCR结果显示,模型对照组中TLR4、MyD88及NF-κB的mRNA表达量明显高于正常对照组;保护药物组中:TLR4 mRNA表达量在各药物处理组中均明显低于PAN组(P＜0.05),其中的SPE高、低剂量组,RA高、低剂量组,SalB+ RA高剂量组与正常组相接近(P＞0.05);MyD88 mRNA表达量在SPE及其单体处理后均有明显下调(P＜0.05);NF-κB mRNA表达量除SalB高剂量组中无明显下调外(P＞0.05),其余各保护药物组均下调(P＜0.05).结论:SPE及其活性单体对PAN诱导损伤足细胞的保护作用机制可能部分通过抑制TLR4信号相关蛋白表达来实现;甘西鼠尾草总酚酸提取物中的单体迷迭香酸对TLR4及其下游信号分子MyD88、NF-κB的抑制作用优于丹酚酸B和混合给药组.

关键词：足细胞、嘌呤霉素氨基核苷、甘西鼠尾草总酚酸提取物、迷迭香酸、丹酚酸B、TLR4

所属期刊栏目：18

资助基金：南京军区医学创新重大课题15DX008

在线出版日期：2018-05-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：672-675,后插2